[发明专利]一种柑橘遗传背景鉴定用PCR引物、试剂盒及鉴定方法有效
申请号: | 201910273390.2 | 申请日: | 2019-04-05 |
公开(公告)号: | CN110144419B | 公开(公告)日: | 2021-05-18 |
发明(设计)人: | 潘志勇;樊正炎;彭抒昂;邓秀新 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 武汉泰山北斗专利代理事务所(特殊普通合伙) 42250 | 代理人: | 程千慧 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 柑橘 遗传 背景 鉴定 pcr 引物 试剂盒 方法 | ||
1.一种柑橘遗传背景鉴定方法,其特征在于,使用包含柑橘遗传背景鉴定用PCR引物的试剂盒 ,该方法为:提取柑橘待测样品的DNA,用所述柑橘遗传背景鉴定用PCR引物进行PCR扩增,然后采用琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物,当扩增产物中出现一条扩增条带时,若条带大小为1.8K判定为具有柚的遗传背景,若条带大小为1.4K判定为具有橘的遗传背景,若条带大小为1K判定为具有原始柑橘的遗传类型,当扩增产物中出现两条扩增条带时,根据孟德尔遗传规律进行判定,所述柑橘遗传背景鉴定用PCR引物包括上游引物Citrus-F和下游引物Citrus-R,其核苷酸序列分别为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2,所述原始柑橘包括枳、莽山野柑、枸橼、宜昌橙。
2.根据权利要求1所述的一种柑橘遗传背景鉴定方法,其特征在于,所述待测样品为待测柑橘的叶片。
3.根据权利要求2所述的一种柑橘遗传背景鉴定方法,其特征在于,PCR扩增的反应程序为:95℃预变性3分钟,95℃变性15秒,56℃复性15秒,72℃延伸2分钟,共35个循环,最后72℃延伸5分钟。
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