[发明专利]柿蒂提取熊果酸和齐墩果酸的方法

说明书

本发明公开了一种从柿蒂中提取熊果酸和齐墩果酸的方法。具体包括如下步骤：将柿蒂用纤维素酶、半纤维素、木质素酶分别预处理后通过水浸取提取、浓缩，从而得到浸膏Ⅰ；再用石油醚淋洗，乙醇溶解，过滤，进行分离（模拟移动床色谱），得到含有熊果酸的组分Ⅱ和含有齐墩果酸的组分Ⅲ；干燥分别得到纯度较高熊果酸和齐墩果酸。本发明所述的方法，采用水浸提取和模拟移动床色谱法分离提纯结合的工艺，可以同时得到两种产物，同时萃取剂具有明显提高熊果酸和齐墩果酸的溶出率，产品纯度较高，步骤简单，节约原料资源并提高了生产效率。

技术领域

本发明属于天然产物开发技术领域，具体为一种柿蒂提取熊果酸和齐墩果酸的方法。

背景技术

柿蒂，一种中药材，为柿树科植物柿（Diospyros kaki Thunb.）的干燥宿萼，其味苦、涩、平，用于降逆止呃。柿蒂在《本草纲目》、《济生》、《本草求真》等古代著作中均有记载。如《本草求真》中记载有：“柿蒂味苦性平，虽与丁香同为止呃之味，然一辛热一苦平，合用兼得寒热兼济之妙”。柿，冬季果实成熟时采摘，食用时收集，洗净，晒干，主要生产于河北、河南、山东等地；现代研究表明，柿蒂中含有多种活性成分和营养物质，包括熊果酸、齐墩果酸等。由于它们具有广泛的应用价值，所以关于它们的提取方法及如何高效提取的研究至关重要。

熊果酸，原名Ursolic Acid，熊果酸高含量为有光泽的棱柱状（无水乙醇）或者细毛样针状结晶（稀乙醇），是存在于天然植物中的一种五环三萜类化合物。具有镇静、抗炎、抗菌、抗糖尿病、抗溃疡、降低血糖等多种生物学效应，同时熊果酸也具有明显的抗氧化功能，所以被广泛地应用到医药和化妆品。熊果酸临床表现显著且迅速降低谷丙转氨酶、血清转氨酶、增进食欲、抗纤维化和恢复肝功能的作用，具有见效快、疗程短、效果稳定的特点。

齐墩果酸是一种从龙胆科植物獐牙菜属的青叶胆全草或女贞子的果实中分离提取而得到的五环三萜类化合物，以游离体和配糖体的形式存在于多种植物中。齐墩果酸为广谱抗菌药，临床上用于护肝降酶，治疗支气管炎、急性扁桃体炎、牙周炎、菌痢、急性肠胃炎、泌尿系统感染。另外，临床上还用于治疗急性肝炎。

发明内容

本发明目的是提供一种从柿蒂中提取熊果酸和齐墩果酸的方法，该方法利用了纤维素酶、半纤维素酶和木质素酶分别对柿蒂进行预处理，柿蒂中提取熊果酸和齐墩果酸结合了水浸取提取，方法简单，卫生环保，能耗低，投资成本低。

本发明是采用如下技术方案实现的：

一种柿蒂提取熊果酸和齐墩果酸的方法，包括如下步骤：

（1）、将干燥的柿蒂粉碎用纤维素酶进行预处理；具体为，酶添加量25~35U/g，料液比1:25~1:35g/ml，酶处理温度45~65℃，酶处理时间20~60min，pH为4.5~6.5；

（2）、步骤（1）得到的样品再用半纤维素进行预处理；具体为，酶添加量85~95U/g，料液比1:10~1:15g/ml，酶处理温度为50~70℃，酶处理时间4~6h，pH为5.5~8；

（3）、步骤（2）得到的原料用木质素酶进行预处理；具体为，酶添加量40~50U/g，料液比1:10~1:20g/ml，酶处理温度30~55℃，酶处理时间4~6h，pH为4~6；

（4）、步骤（3）得到的原料与萃取剂，按1:8~24（w/w）投料比例进行浸提，浸提温度为70~100℃，处理1~6小时，期间不时地对原料进行搅拌，留取料液；

（5）、步骤（4）得到的料液过滤，将200目以下的杂质除去，料液冷却至40℃以下；

（6）、将步骤（5）得到的料液，减压浓缩后得到浸膏Ⅰ；

（7）、加入石油醚对浸膏Ⅰ淋洗，再用乙醇溶液溶解过滤，使滤液采用模拟移动床色谱进行分离，得到含有熊果酸的组分Ⅱ和含有齐墩果酸的组分Ⅲ；