[发明专利]一种检测TIM-3抗体活性的试剂盒和方法有效
| 申请号： | 201910279725.1 | 申请日： | 2019-04-09 |
| 公开（公告）号： | CN109975537B | 公开（公告）日： | 2022-05-24 |
| 发明（设计）人： | 潘隽;聂思惟;吴琼;刘静静;万雅莉;郭新东;郑勇;李竞 | 申请（专利权）人： | 上海药明生物技术有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/533 | 分类号： | G01N33/533;G01N33/535;G01N33/543;G01N33/577 |
| 代理公司： | 北京安杰律师事务所 11627 | 代理人： | 杨剑;孙秀武 |
| 地址： | 200131 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 tim 抗体 活性 试剂盒 方法 | ||
1.一种检测TIM-3抗体活性的试剂盒，其包含：
(i)免疫细胞，所述免疫细胞的细胞表面上展示全长序列的TIM-3抗原，以及报告基因基团；和
(ii)微珠，所述微珠与CD-3抗体交联；
其中，所述免疫细胞为Jurkat细胞，所述报告基因为荧光素酶，所述报告基因的靶启动子为IL2启动子。
2.如权利要求1所述的试剂盒，其进一步包括以下中的至少一种：
1)CD-28抗体；
2)报告基因底物。
3.如权利要求1或2所述的试剂盒，其中，所述微珠为磁珠。
4.如权利要求3所述的试剂盒，其中，所述微珠为超顺磁珠。
5.如权利要求3所述的试剂盒，其中，所述免疫细胞和微珠的个数比例范围为100:1至1:100。
6.如权利要求1或2所述的试剂盒，其中，所述TIM-3抗原为人源的。
7.如权利要求1或2所述的试剂盒，其中，所述CD-3抗体为人源的。
8.如权利要求2所述的试剂盒，其中，所述CD-28抗体为人源的。
9.一种检测TIM-3抗体活性的方法，其包括以下步骤：
a)将免疫细胞和微珠接触，其中，所述免疫细胞的细胞表面上展示外源全长序列的TIM-3抗原，以及所述免疫细胞能够表达报告基因；所述微珠与CD-3抗体交联；
b)使所述免疫细胞与TIM-3抗体接触；以及
c)测量报告基因活性；
其中，所述免疫细胞为Jurkat细胞，所述报告基因为荧光素酶，所述报告基因的靶启动子为IL2启动子。
10.如权利要求9所述的方法，其中，在所述步骤a)中，使所述免疫细胞进一步和CD-28抗体接触。
11.如权利要求10所述的方法，其中，所述微珠为磁珠。
12.如权利要求11所述的方法，其中，所述微珠为超顺磁珠。
13.如权利要求11所述的方法，其中，所述免疫细胞和微珠的个数比例范围为100:1至1:100。
14.如权利要求9或10所述的方法，其中，所述TIM-3抗原为人源的。
15.如权利要求9或10所述的方法，其中，所述CD-3抗体为人源的。
16.如权利要求10所述的方法，其中，所述CD-28抗体为人源的。
17.如权利要求1至8中任一项所述试剂盒在制备用于检测TIM-3抗体的免疫细胞活化功能的产品中的应用。
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