[发明专利]一种巴斯德毕赤酵母及其应用

权利要求书

1.一种巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)，其特征在于，其保藏编号为CCTCC NO:M2016763。

2.一种紧密连接蛋白ZO-1、层粘连蛋白和/或纤连蛋白的基因表达上调剂，其特征在于，所述的基因表达上调剂的制备方法包括：在培养基中培养权利要求1中所述的巴斯德毕赤酵母，获得发酵产物后离心并收集上清即得；

所述的层粘连蛋白优选层粘连蛋白332。

3.如权利要求2所述的基因表达上调剂，其特征在于，所述的培养基为BMMY培养基，其包括2wt％蛋白胨、1wt％酵母提取物、100mM磷酸钾缓冲液、1.34wt％YNB、4×10^-5wt％生物素以及0.5v/v％甲醇，余量为水；所述磷酸钾缓冲液的pH为6.0；

所述培养的时间为2～4天；

所述培养的温度为25～30℃；

所述培养为震荡培养，所述震荡培养的速度优选200～300rpm，更优选250rpm；

和/或，所述培养的接种量为2～10v/v％，优选5v/v％。

4.如权利要求2或3所述的基因表达上调剂，其特征在于，在所述培养过程中，每24小时补加0.1～2.0v/v％甲醇；较佳地为每24小时补加0.5v/v％甲醇；

和/或，在所述的培养前，还包括使用种子培养基进行种子培养的步骤；所述种子培养的时间为16～18小时，所述种子培养的温度为30℃。

5.如权利要求4所述的基因表达上调剂，其特征在于，所述种子培养为震荡培养，所述震荡培养的转速优选250rpm。

6.如权利要求1所述的巴斯德毕赤酵母在制备紧密连接蛋白ZO-1、层粘连蛋白和/或纤连蛋白的基因表达上调剂中的应用；所述的层粘连蛋白优选层粘连蛋白332。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，培养所述的巴斯德毕赤酵母获得其发酵产物，利用所述的发酵产物制备所述基因表达上调剂。

8.如权利要求6或7所述的应用，其特征在于，所述基因表达上调剂适用于化妆品或者护肤品中。

9.一种紧密连接蛋白ZO-1、层粘连蛋白和/或纤连蛋白的基因表达上调剂的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包括培养如权利要求1所述的巴斯德毕赤酵母，获得其发酵产物后离心并收集上清即得；

所述的层粘连蛋白优选层粘连蛋白332。

10.如权利要求9所述的制备方法，所述的基因表达上调剂适用于化妆品或者护肤品中。