[发明专利]一种基于黄腐酸联合盐胁迫提高单针藻油脂积累的方法

权利要求书

1.一种基于黄腐酸联合盐胁迫提高单针藻油脂积累的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1、制备诱导培养基；

步骤2、接入单针藻进行摇瓶培养；

步骤3、制备生物柴油。

2.根据权利要求1所述的一种基于黄腐酸联合盐胁迫提高单针藻油脂积累的方法，其特征在于，所述步骤1中制备诱导培养基具体为：选择一定量Kuh1培养基作为基本培养基，添加25mg/L黄腐酸；在上述培养基中添加不同浓度的氯化钠，调整pH值在6.8-7.0之间，培养基高温高压灭菌121℃，20min。

3.根据权利要求2所述的一种基于黄腐酸联合盐胁迫提高单针藻油脂积累的方法，其特征在于，所述NaCl的浓度分别为0g/L、5g/L、10g/L、15g/L、20g/L、25g/L、30g/L。

4.根据权利要求3所述的一种基于黄腐酸诱导联合盐胁迫提高单针藻油脂积累的方法，其特征在于，所述单针藻初始接种量为0.7g/L；光照强度3500～4000lux；摇床转速150r/min，温度24～25℃。

5.根据权利要求1所述的一种基于黄腐酸联合盐胁迫提高单针藻油脂积累的方法，其特征在于，所述步骤3中制备生物柴油具体为：将藻细胞培养液离心收集，3500r/min，10min，并以蒸馏水反复洗涤两次后离心冻干；添加冻干藻粉2倍质量石英砂研磨后用氯仿/甲醇(2:1，v/v)提取油脂，重复提取2次后收集提取液浓缩，上述提取油脂添加硫酸/甲醇(3:97，v/v)进行甲酯化制备得到生物柴油。

6.根据权利要求3所述的一种基于黄腐酸联合盐胁迫提高单针藻油脂积累的方法，其特征在于：所述NaCl浓度为10-20g/L时，油脂产率高于其他实验组。

7.根据权利要求3所述的一种基于黄腐酸联合盐胁迫提高单针藻油脂积累的方法，其特征在于，步骤1中NaCl浓度为20g/L时，诱导油脂含量高于其他实验组。

8.根据权利要求3所述的一种基于黄腐酸联合盐胁迫提高单针藻油脂积累的方法，其特征在于，所述单针藻先以10g/L葡萄糖为碳源的基础培养基BG-11中无光照异养培养单针藻藻种，待藻种生长至稳定期后接种至诱导培养基Kuh1中，置于25℃条件下，进行光照摇瓶培养。