[发明专利]化妆品中糖皮质激素和性激素色谱-质谱检测方法

说明书

本发明公开了化妆品中糖皮质激素和性激素检测的前处理体系及其色谱‑质谱检测的前处理方法和应用，特点是包括专用提取剂和专用净化管，专用提取剂由乙腈、甲醇、四氢呋喃、二甲亚砜和水按体积比3:4:2:1:3的比例混合而成；专用净化管含C₄填料和若干粒陶瓷均质子，C₄填料填充量为50 mg/每mL溶剂；其用于色谱‑质谱检测的前处理方法，包括以下步骤：1）称取待测化妆品样品于离心管中后，加入专用提取剂和正己烷，漩涡混合离心分成两层；2）移取下层清液到专用净化管中充分漩涡混匀，快速摇晃后离心，取上清液稀释后经滤膜过滤到进样瓶中待LC‑MS/MS测定，优点是净化效果良好、回收率和精密度理想，同时又快速简便。

技术领域

本发明涉及一种前处理试剂，尤其是涉及化妆品中糖皮质激素和性激素检测色谱-质谱检测的前处理方法和应用。

背景技术

化妆品的基质极为复杂，其含油量高，尤其乳液、护手霜、洗发水等。低含量的糖皮质激素和性激素一般通过LC-MS/MS分析。糖皮质激素和性激素为脂溶性化合物，其提取容易带来脂溶性杂质，形成严重干扰。因此，去脂处理必不可缺。正己烷去脂是最简便最常用的去脂手段。一般采用50％～80％含量的乙腈或甲醇水溶液溶解后，通过正己烷洗涤去脂，然而，这种条件下，糖皮质激素和性激素容易损失，尤其是含有酯键的糖皮质激素和含有酯键的性激素，极易被正己烷萃取，造成回收率低下。国标方法 GB/T 24800.2-2009，采用50％甲醇和正己烷提取后，下层经沉淀剂沉淀蛋白后，通过 HLB固相萃取小柱净化。前处理过程复杂，耗时费力，效率低。化妆品安全技术规范 2015版中孕酮等7种激素则通过甲醇提取，过滤后直接进样，净化效果太差，极易污染色谱柱。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种净化效果良好、回收率和精密度理想，同时又快速简便的化妆品中糖皮质激素和性激素检测色谱-质谱检测的前处理方法和应用。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：

1、一种化妆品中糖皮质激素和性激素检测的前处理体系，包括专用提取剂和专用净化管，所述的专用提取剂由乙腈、甲醇、四氢呋喃、二甲亚砜和水按体积比3:4:2:1:3的比例混合而成；所述的专用净化管含C₄填料和若干粒陶瓷均质子，所述的C₄填料的填充量为50mg/每mL试管。

所述的C₄填料为硅胶键合丁基基团的填料，粒径为40-50μm；所述的陶瓷均质子数量为15mL试管中含有4粒陶瓷均质子，所述的陶瓷均质子的大小为直径×长度＝3×6mm。

2、一种化妆品中糖皮质激素和性激素色谱-质谱检测的前处理方法，包括以下步骤：

(1)提取：对于水含量高的化妆水化妆品，称取0.50g待测化妆品样品于50mL塑料离心管中，然后加入9.5mL专用提取剂和10mL正己烷，漩涡混合2～3min，4000转 /min离心5min，分成两层；对于水含量较少的乳液化妆品：称取0.50g待测化妆品样品于50mL塑料离心管中，加入专用提取剂和正己烷各10mL，漩涡混合2-3min，4000 转/min离心5min，分成两层；

(2)净化：移取1.5mL下层清液到专用净化管中，充分漩涡混匀2min，10000转/min离心2min，取750μL上清液，用等量的水稀释后，经0.2μm孔径的尼龙滤膜过滤到进样瓶中，待LC-MS/MS测定。

所述的专用提取剂由乙腈、甲醇、四氢呋喃、二甲亚砜和水按体积比3:4:2:1:3 的比例混合而成；所述的专用净化管含C₄填料和若干粒陶瓷均质子，所述的C₄填料的填充量为50mg/每mL溶剂。

所述的C₄填料为硅胶键合丁基基团的填料，粒径为40-50μm；所述的陶瓷均质子数量为15mL试管中含有4粒陶瓷均质子，所述的陶瓷均质子的大小为直径×长度＝3 ×6mm。