[发明专利]一种表面展示猪轮状病毒VP7蛋白的重组类干酪乳杆菌的构建及其应用在审

专利信息
申请号: 201910287460.X 申请日: 2019-04-11
公开(公告)号: CN110042076A 公开(公告)日: 2019-07-23
发明(设计)人: 余丽芸;李丽阳;侯喜林 申请(专利权)人: 黑龙江八一农垦大学
主分类号: C12N1/21 分类号: C12N1/21;C12N15/74;A61K39/15;A61P31/14;C12R1/225
代理公司: 大庆禹奥专利事务所 23208 代理人: 朱士文;杨晓梅
地址: 163000 黑龙江*** 国省代码: 黑龙江;23
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摘要:
搜索关键词: 类干酪乳杆菌 猪轮状病毒 构建 表面展示 免疫效果 乳酸菌 全长基因序列 基因工程 基因序列 抗原表位 口服方式 轮状病毒 免疫小鼠 基因组 重组菌 仔猪 制备 应用 表现 研究
【权利要求书】:

1.一种表面展示猪轮状病毒VP7蛋白的重组类干酪乳杆菌,其特征在于:是在类干酪乳杆菌的基因组中插入猪轮状病毒VP7蛋白的基因序列。

2.根据权利要求1所述的表面展示NDV F的重组类干酪乳杆菌,其特征在于:猪轮状病毒VP7蛋白的基因序列如SEQ ID No.1所示。

3.一种根据权利要求1所述的表面展示猪轮状病毒VP7蛋白的重组类干酪乳杆菌的构建方法,其特征在于:该方法包括以下步骤:

(1)猪轮状病毒VP7蛋白的基因片段的扩增;

(2)目的片段构建入穿梭质粒PLA,转化大肠杆菌,筛选得阳性重组质粒pLA-VP7;

(3)阳性重组质粒pLA-VP7转化类干酪乳杆菌,筛选得筛选阳性重组类干酪乳杆菌pLA-VP7/L.paracasei。

4.根据权利要求3所述的构建方法,其特征在于:步骤(1)中扩增所用引物序列为:

Forward:5'-ACGCGTCGACGGCTTTAAAAGAGAGAATTT–3(SEQ ID No.2)

Reverse:5'-CCCAAGCTTGGTCACATCATACAACTCTAATC–3(SEQ ID No.3)。

5.权利要求1所述的表面展示猪轮状病毒VP7蛋白的重组类干酪乳杆菌在抗猪轮状病毒中的应用。

6.权利要求1所述的表面展示猪轮状病毒VP7蛋白的重组类干酪乳杆菌的给药方式为黏膜给药。

7.根据权利要求6所述的表面展示猪轮状病毒VP7蛋白的重组类干酪乳杆菌,其特征在于:所述的黏膜给药为口服。

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