[发明专利]超敏检测NAs治疗下乙型肝炎病毒DNA的寡核苷酸组合物、试剂盒、方法及用途在审
| 申请号： | 201910290680.8 | 申请日： | 2019-04-11 |
| 公开（公告）号： | CN111808985A | 公开（公告）日： | 2020-10-23 |
| 发明（设计）人： | 鲁凤民;邹军;于广鑫;刘永振;陈香梅;王杰 | 申请（专利权）人： | 北京大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京集智东方知识产权代理有限公司 11578 | 代理人： | 陈亚斌;关兆辉 |
| 地址： | 100871*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 检测 nas 治疗 乙型肝炎 病毒 dna 寡核苷酸 组合 试剂盒 方法 用途 | ||
1.一种用于超敏检测核苷(酸)类药物(nucleos(t)ide analogues，NAs)治疗下乙型肝炎病毒DNA的寡核苷酸组合物，其包括第一寡核苷酸和第二寡核苷酸，或者与所述第一寡核苷酸的序列互补的寡核苷酸和与所述第二寡核苷酸的序列互补的寡核苷酸；第一核苷酸、第二核苷酸之间的距离为30-350nt，所述第一核苷酸序列和第二核苷酸序列均为X区的序列(该区最接近逆转录起始位置)。
2.根据权利要求1所述的用于超敏检测核苷(酸)类药物乙型肝炎病毒DNA的寡核苷酸组合物，其中所述第一寡核苷酸和所述第二寡核苷酸的长度分别为10-50nt。
3.根据权利要求1所述的用于超敏检测核苷(酸)类药物治疗下乙型肝炎病毒DNA的寡核苷酸组合物，其中所述第二核苷酸序列靠近逆转录起始处，即靠近HBV基因组直接重复区1(DR1)位置。
4.根据权利要求1所述的用于超敏检测核苷(酸)类药物治疗下乙型肝炎病毒DNA的寡核苷酸组合物，其中所述第一寡核苷酸和第二寡核苷酸特异性结合于X区的保守区。
5.根据权利要求1所述的用于超敏检测核苷(酸)类药物治疗下乙型肝炎病毒DNA的寡核苷酸组合物，其中所述第一寡核苷酸的序列选自SEQ ID NO:1-7所示的序列组成的组中的至少一种；所述第二寡核苷酸的序列选自SEQ ID NO:8-14所示的序列组成的组中的至少一种；
优选地，所述第一寡核苷酸的序列如SEQ ID NO:3和/或4所示，且所述第二寡核苷酸的序列如SEQ ID NO:10和/或11所示。
6.根据权利要求1-5任一项所述的用于超敏检测核苷(酸)类药物治疗下乙型肝炎病毒DNA的寡核苷酸组合物，其进一步包括第三寡核苷酸，所述第三寡核苷酸能够特异性结合至所述第一序列的至少一部分连续序列与所述第二序列的至少一部分连续序列之间，且所述第三寡核苷酸包含荧光基团；
优选地，所述第三寡核苷酸具有如SEQ ID NO:15-18任一项所示的结构。
7.一种试剂盒，其包含根据权利要求1-6任一项所述的寡核苷酸组合物。
8.一种超敏检测核苷(酸)类药物治疗下的样品中乙型肝炎病毒DNA水平的方法，其包括使用根据权利要求1-6任一项所述的寡核苷酸组合物或根据权利要求7所述的试剂盒的步骤；优选地，所述样品为血液及其制品，例如血清、血浆；所述检测方法包括SYBR Green实时荧光定量PCR方法、Taqman探针定量PCR方法、MGB实时荧光定量PCR方法和微滴数字PCR。
9.根据权利要求1-6任一项所述的寡核苷酸组合物作为核酸扩增引物或探针的用途；优选根据权利要求1-6任一项所述的寡核苷酸组合物在制备用于检测剂或诊断剂中的用途。
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