[发明专利]一种定量测定总胆固醇浓度的干化学试剂片及其制备方法

说明书

本发明涉及临床体外诊断试剂技术领域，特别涉及一种定量测定总胆固醇浓度的干化学试剂片及其制备方法。该干化学试剂片包含四个叠层，依次为支持层、显色层、试剂层和扩散层；试剂层中的试剂包括缓冲体系、亲水性胶体、过氧化物酶、激活剂、表面活性剂、稳定剂；显色层中的试剂包括色原、亲水性胶体。与现有技术相比，本发明具有以下优点：操作过程简单，试剂无需配制，直接滴加样本检测；试剂片干燥无水分，试剂片稳定性良好；扩散层具有过滤功能，溶血、胆红素和抗坏血酸样本对测定结果没有明显干扰；检测结果重复性好、准确性高，可进行定量检测，线性范围宽；制备过程简便，易操作，危害性、污染性小。

技术领域

本发明涉及临床体外诊断试剂技术领域，特别涉及一种定量测定总胆固醇浓度的干化学试剂片及其制备方法。

背景技术

血清总胆固醇是指血液中所有脂蛋白所含胆固醇的总和，包括游离胆固醇和胆固醇酯。肝脏是合成和贮存的主要器官。总胆固醇偏高说明人体的肝和肺开始发生实质性的病变。人群总胆固醇水平主要取决于遗传因素和生活方式。胆固醇是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸及维生素D等生理活性物质的重要原料，也是构成细胞膜的主要成分，其血清浓度可作为脂代谢的指标。人体的胆固醇除来自食物外，还可在体内由乙酰辅酶A合成，成人肝脏和小肠可提供约90％的内源性胆固醇。血清胆固醇水平受年龄、性别等影响。除家族性高胆固醇血症外，血清胆固醇增高多见于继发于肾病综合征、甲状腺功能减低、糖尿病和胆道梗阻等。由于血清总胆固醇与动脉粥样硬化、冠心病、脑卒中等心脑血管疾病关系密切，血清总胆固醇测定已成为血脂分析的常规项目。

目前测定总胆固醇的方法按试剂类型可分为液体试剂和干化学试剂两种方法。

液体试剂的检测方法主要有分光光度法、旋光度法、气相色谱法、高效液相色谱法等。这些方法对总胆固醇浓度进行检测需要特定的设备，设备本身较为昂贵，不具有经济性；同时需要专业技术人才操作仪器，不具有应有的普适性。方法测定周期长，分析过程较为复杂，无法实现总胆固醇的实时测定。

干化学属于固相化学范畴，它指的是将液体样本直接加到已固化于特殊结构的试剂载体即所谓干式化的试剂中，以样品中的水为溶剂将固化在载体上的试剂溶解后再与样品中的待测成分进行化学反应，从而进行分析测定的一种方法。

干化学试剂主要应用于急诊、现场检测。具有简便、快速、灵活以及无需专业人员操作等优点。目前国内基本为定性或半定量测定，这种干化学试剂片均是由滤纸、纤维素片、多孔胶膜等一类片层物质预先固定全部试剂，两层和三层经过堆叠、粘合、冲压等处理结合。测量线性范围不大，遇到有使用药物情况下会干扰实验结果。有许多分析测试中的试剂不能预先混合，而且复杂测试液需要预处理，这就限制了干化学试剂片应用领域。定量检测的干化学试剂卡都为国外生产。以强生公司和富士公司为代表的多层膜干片法，利用感光胶片的涂层技术将试剂层、辅助试剂层、光漫射层和分布层等试剂涂布在透明支持层上，从支持层的反面测定光密度的变化。上述干化学试剂片虽能定量检测，但分布层或扩散层需用到有机试剂，对材料设备要求高，生产工艺复杂，并且对制备人员健康危害极大，污染环境。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种定量测定总胆固醇浓度的干化学试剂片及其制备方法。该干化学试剂片检测结果准确性高，精密度好，稳定性好，保存期长，操作简便，适用范围广。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种定量测定总胆固醇浓度的干化学试剂片，包含四个叠层，依次为支持层、显色层、试剂层和扩散层；

试剂层中的试剂包括缓冲体系、亲水性胶体、过氧化物酶、激活剂、表面活性剂、稳定剂；各组分用量为：

显色层中的试剂包括色原、亲水性胶体。