[发明专利]一种用于检测头颈鳞癌致癌基因检测的探针序列及其试剂盒、应用有效
申请号: | 201910298494.9 | 申请日: | 2019-04-15 |
公开(公告)号: | CN109943665B | 公开(公告)日: | 2023-05-16 |
发明(设计)人: | 李先坤;何丽 | 申请(专利权)人: | 郑州科蒂亚生物技术有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/682;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 赵青朵 |
地址: | 450000 河南省郑州市高*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 头颈 致癌 基因 探针 序列 及其 试剂盒 应用 | ||
1.一种检测头颈鳞癌致癌基因的试剂盒,其特征在于,包括HPV16和HPV18型探针,放大分子、预放大分子、碱性磷酸酶标记的报告探针、蛋白酶K、化学发光底物、底物催化剂、裂解液、洗脱液、探针稀释液和偶联有通用探针的细胞培养板;
所述HPV16、HPV18型探针序列均由捕获延长探针、标记延长探针和封闭探针组成;其中,
所述HPV16型捕获延长探针序列如SEQ ID No.1~6所示,
所述HPV16型标记延长探针序列如SEQ ID No.7~30所示;
所述HPV16型封闭探针序列如SEQ ID No.31-36所示;
所述HPV18型捕获延长探针序列如SEQ ID No.37~44所示,
所述HPV16型标记延长探针序列如SEQ ID No.45~70;
所述HPV16型封闭探针序列如SEQ ID No.71-73所示;
所述通用探针的序列如SEQ ID No.74所示;
所述报告探针的序列如SEQ ID No.54所示;
所述预放大分子包括预放大前导序列和20×放大分子前导序列的互补序列,所述预放大分子的序列为:
AAGCCGAATCCGAATACGTCGGTAAAATTCGAATGATTC-20×-AGGATCGTAAGTAACTAAGGACTACC;
所述信号放大分子包括放大分子前导序列和20×报告探针的互补序列,所述信号大分子的序列为:
GGTAGTCCTTAGTTACTTACGATCCT-20×-GAATCCATTGAATCCTGTGATT;
所述预放大前导序列与所述标记延长探针部分序列互补;
所述探针稀释液包括Hepe钠盐、Hepe游离酸、无水氯化锂、十二烷基硫酸锂和Brij-35;
所述化学发光底物为AMPPD或CDP-star;
所述底物催化剂为十二烷基硫酸锂;
所述裂解液选自Hepes钠盐、Hepes游离酸、氯化锂、乙二酸四乙酸、十二烷基硫酸锂中的一种;所述洗脱液为十二烷基硫酸锂或柠檬酸钠。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,还包括HPV16的阳性质控品和阴性质控品、HPV18的阳性质控品和阴性质控品。
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