[发明专利]一种从猪肠道分离贝氏酵母菌的方法及其发酵方法在审
申请号: | 201910303015.8 | 申请日: | 2019-04-16 |
公开(公告)号: | CN109971662A | 公开(公告)日: | 2019-07-05 |
发明(设计)人: | 谭瑛 | 申请(专利权)人: | 北京中特养生物技术研究所有限公司 |
主分类号: | C12N1/16 | 分类号: | C12N1/16;C12N1/02;C12R1/645 |
代理公司: | 北京力量专利代理事务所(特殊普通合伙) 11504 | 代理人: | 徐颖超 |
地址: | 100085 北京市海淀区上地*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 酵母菌 猪肠道 酵母菌培养基 菌液 发酵 耐受性 助消化 生理盐水稀释 动物消化道 高密度培养 微生物领域 发酵成本 均匀扩散 菌液接种 液体培养 促生长 动物体 内容物 灭菌 定植 混匀 菌体 腹泻 菌种 同源 预防 | ||
1.一种从猪肠道分离贝氏酵母菌的方法,其特征在于,包括如下步骤:将猪肠道内容物置于灭菌瓶内,加生理盐水稀释,混匀得到菌液;将菌液接种于酵母菌培养基中,使菌液在所述酵母菌培养基的表面均匀扩散,在30-34℃下培养20-28h,得到贝氏酵母菌的菌体。
2.根据权利要求1所述的从猪肠道分离贝氏酵母菌的方法,其特征在于,所述酵母菌培养基中包括:蛋白胨、麦芽糖、酒石酸、牛肉粉、氯化钠与琼脂。
3.根据权利要求2所述的从猪肠道分离贝氏酵母菌的方法,其特征在于,所述酵母菌培养基按照质量百分比计包括:蛋白胨1%、麦芽糖4%、浓度为10%的酒石酸溶液1.4%、牛肉粉0.35%、氯化钠0.5%、琼脂2%,余量为水。
4.根据权利要求3所述的从猪肠道分离贝氏酵母菌的方法,其特征在于,所述酵母菌培养基的pH为5.8-6.0。
5.一种从猪肠道分离的贝氏酵母菌的发酵方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)将权利要求1-4中任意一项所述的贝氏酵母菌的菌体接种于酵母菌发酵培养基中,培养基pH为6.0-6.5,于28-32℃、150-200rpm的条件下培养24-36h,得到一级种子发酵液;
(2)将步骤(1)中得到的一级种子发酵液接种于酵母菌发酵培养基中,于30-34℃、180-220rpm的条件下培养10-15h,得到二级种子发酵液;
(3)将步骤(2)中得到的二级种子发酵液接种于酵母菌发酵培养基中,于30-34℃、180-220rpm的条件下培养4-8h,即可。
6.根据权利要求5所述的贝氏酵母菌的发酵方法,其特征在于,步骤(1)中,所述一级种子发酵液的菌体为6h-12h对数生长期的贝氏酵母菌;步骤(2)中,所述二级种子发酵液的菌体为对数生长期的贝氏酵母菌。
7.根据权利要求5所述的贝氏酵母菌的发酵方法,其特征在于,步骤(1)中,所述的贝氏酵母菌的菌体的接种量为3-10%;步骤(2)中,所述一级种子发酵液的接种量为4-10%;步骤(3)中,所述二级种子发酵液的接种量为4-10%。
8.根据权利要求5所述的贝氏酵母菌的发酵方法,其特征在于,所述酵母菌发酵培养基包括:酵母浸粉、蛋白胨、葡萄糖与微量盐。
9.根据权利要求8所述的贝氏酵母菌的发酵方法,其特征在于,所述酵母菌发酵培养基按照质量份数计包括:酵母浸粉4-6份、蛋白胨2-6份、葡萄糖4-12份、微量盐。
10.根据权利要求9所述的贝氏酵母菌的发酵方法,其特征在于,所述微量盐包括氯化钙、硫酸镁、碳酸氢钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾与氯化钠中的一种或多种。
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