[发明专利]一种具有调控血管细胞生长作用的功能丝素材料及其制备方法

说明书

本发明公开了一种具有调控血管细胞生长作用的功能丝素材料及其制备方法，先制备脱胶后的家蚕丝素纤维，然后制备家蚕丝素溶解液，接着制备纯化后的家蚕丝素蛋白水溶液，最后制备具有调控血管细胞生长作用的功能丝素材料。该方法制备的产品可用于制备生物医用材料，作为药物载体或载药支架，从而应用于心血管等组织疾病的治疗、组织的修复或再生。该功能丝素材料属于非溶血性材料，溶血率0.3％，具有优异的细胞相容性，更重要的是能够显著促进内皮细胞的粘附与增殖，同时对平滑肌细胞的增殖有一定的抑制作用，在制作人工血管或血管支架方面有利于快速内皮化和阻止内膜增生，抑制血栓形成。

技术领域

本发明涉及载药的丝素蛋白材料的制备技术领域，具体涉及一种具有调控血管细胞生长作用的功能丝素材料及其制备方法。

背景技术

家蚕蚕丝是由家蚕合成与分泌的天然动物蛋白，来源广泛，其丝素蛋白具有良好的生物相容性，由20种人体可吸收的氨基酸组成，最终降解产物为氨基酸或小肽，易被细胞吸收或吞噬，不会引起明显的免疫反应。大量的研究表明丝素蛋白材料能够支持多种细胞的生长，在组织工程支架中越来越多地被研究与应用。

本发明旨在开发一种载有降钙素基因相关肽(CGRP)的丝素蛋白功能材料，应用于血管组织再生修复。CGRP是一个由37个氨基酸组成的广泛分布于中枢和外周神经系统的活性肽，是中枢和外周神经系统传递信息的重要递质。神经系统是遍布全身的调节机体各项生理功能与行为活动的系统。CGRP也是体内发现的最有效的舒血管活性肽，在调节血压、保护心脏和防止冠状动脉粥样硬化有着重要作用。几乎所有的血管中都分布着含有CGRP的神经纤维。CGRP活性肽具有刺激血管舒张，促进血管内皮细胞的增殖的作用，刺激血管内皮细胞的生长并迁移到受损血管壁。CGRP活性肽作为保护性成分，具有抑制血管平滑肌细胞增殖和迁移，参与血管损伤修复等功能。因此，将CGRP活性肽载入血管组织工程支架中用于调控缺损血管再生或功能修复具有重大的应用前景。

发明内容

本发明目的是提供一种具有调控血管细胞生长作用的功能丝素材料及其制备方法，是针对血管组织工程易形成血栓和血管组织再生早期舒张活性较低而开发，以促进病变和缺损血管的组织再生与功能恢复。

本发明的一种技术方案是：

提供一种具有调控血管细胞生长作用的功能丝素材料，该功能丝素材料加载了CGRP。

本发明的另一种技术方案是：

提供一种具有调控血管细胞生长作用的功能丝素材料的制备方法，该方法包括如下步骤：

(1)制备脱胶后的家蚕丝素纤维：将家蚕蚕丝或茧壳放入碳酸钠水溶液、碳酸氢钠水溶液或生物酶水溶液中加温处理，清洗，拉松，干燥，得到脱胶后的家蚕丝素纤维；

(2)制备家蚕丝素溶解液：将所述脱胶后的家蚕丝素纤维完全溶解于溴化锂水溶液中，获得丝素溶解液；

(3)制备纯化后的家蚕丝素蛋白水溶液：将所述丝素溶解液灌注于透析袋内，然后置于盛有去离子水的容器内，每隔2小时用新的去离子水或者纯水更换容器内的液体，持续透析3天后浓缩，得到纯化后的家蚕丝素蛋白水溶液；

(4)制备具有调控血管细胞生长作用的功能丝素材料。

进一步的，步骤(1)中所述将家蚕蚕丝或茧壳放入碳酸钠水溶液、碳酸氢钠水溶液或生物酶水溶液中加温处理是指将家蚕蚕丝或茧壳按1g:50mL的浴比放入质量浓度为0.2～0.8％碳酸钠或0.5～1.0％碳酸氢钠的水溶液中在95～100℃的温度条件下处理2～3次，或1.0～2.5g/L生物酶水溶液中在30～60℃的温度条件下处理2～3次；每次处理30分钟，所述干燥是指在60℃烘箱内干燥。

进一步的，步骤(2)中所述将所述脱胶后的家蚕丝素纤维完全溶解于溴化锂水溶液中是指称取所述脱胶后的家蚕丝素纤维，按1g:10mL的浴比溶解于9.3M的溴化锂水溶液中，在温度为65℃的条件下处理直至丝素纤维完全溶解。