[发明专利]一种检测人体可溶性去唾液酸糖蛋白受体的方法

权利要求书

1.一种非诊断目的体外检测人体可溶性去唾液酸糖蛋白受体ASGPR的方法，其特征在于，以半乳糖基化人血清白蛋白作为ASGPR的特异性配体，应用ELISA法进行检测；

所述方法包括如下步骤：以去唾液酸糖蛋白受体特异性结合的半乳糖基化人血清白蛋白作为配体，将配体包被在酶标板上，封闭，洗涤后加入待测样品，孵育、洗涤后依次加入ASGPR一抗和酶标二抗，再加入底物显色，以显色结果表征待测样品中去唾液酸糖蛋白受体的含量；所述半乳糖基化人血清白蛋白的包被浓度为15~25 μg/mL；

所述方法具体为：用CBS缓冲液稀释的半乳糖基化人血清白蛋白包被酶标板，4 ℃包被12~24 h，随后用洗涤缓冲液洗涤；在包被好的酶标板中加入封闭液，35~37 ℃封闭1.5~2.5h；弃封闭液，用洗涤缓冲液洗涤；向酶标板中加入样品，35~37 ℃孵育2~2.5 h，随后用洗涤缓冲液洗涤，拍干；加入ASGPR一抗35~37 ℃孵育2~2.5 h，随后洗涤缓冲液洗涤；加入HRP标记的羊抗鼠酶标二抗，35~37 ℃孵育1~2 h，洗涤缓冲液洗涤；用TMB显色液显色，避光孵育10~20 min，随后立即用H₂SO₄终止显色；测定450 nm处吸光度。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述CBS缓冲液的浓度为0.03~0.08 M。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述ASGPR一抗购自Santa CruzBiotechnology，货号为sc-166633；所述酶标二抗稀释2000倍后添加；所述酶标二抗购自康为世纪生物科技有限公司，货号为CW0102。

4.权利要求1~3任一所述方法在非诊断目的检测肝功能指标中的应用。