[发明专利]鼠种的分子鉴定方法在审
| 申请号： | 201910311739.7 | 申请日： | 2019-04-18 |
| 公开（公告）号： | CN109943644A | 公开（公告）日： | 2019-06-28 |
| 发明（设计）人： | 姚丹丹;姜洪雪;冯志勇 | 申请（专利权）人： | 广东省农业科学院植物保护研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 郭炜绵 |
| 地址： | 510640 *** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 分子鉴定 线粒体细胞色素 核酸序列同源性 特异性引物 形态学鉴定 遗传多样性 基因组DNA 比对结果 反应程序 基因序列 鉴定结果 亲缘关系 通用性强 序列特征 研究生物 重要意义 同源性 氧化酶 测序 扩增 鼠类 网站 检索 进化 验证 基因 应用 分析 | ||
1.一种鼠种分子鉴定方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)提取待测鼠种的基因组DNA；
(2)分别应用特异性引物扩增线粒体细胞色素C氧化酶亚基I基因和线粒体细胞色素b基因，然后测序；
(3)将测定序列在NCBI网站上运行Blast核酸序列同源性检索，比对结果中同源性最高的序列为亲缘关系最近的鼠种；
步骤(2)中，用于扩增CO I基因的引物对的序列如下：
正向引物CO I-F：5’-CCTACTCRGCCATTTTACCTATG-3’(SEQ ID NO.1)；
反向引物CO I-R：5’-ACTTCTGGGTGTCCAAAGAATCA-3’(SEQ ID NO.2)；
用于扩增cyt b基因的引物对的序列如下：
正向引物cyt b-F：5’--CAGCATTTAACTGTGACTAATGAC-3’(SEQ ID NO.3)；
反向引物cyt b-R：5’--TACACCTAGGAGGTCTTTAATTG-3’(SEQ ID NO.4)。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)中，用鼠的肝脏、肌肉组织、脚趾或尾巴提取基因组DNA。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)中，用于基因扩增的PCR反应体系为：DNA模板1μl，正反向引物各1μl，Premix Taq 25μl，ddH2O 22μl。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)中，用于基因扩增的PCR反应条件：95℃预变性3～5min，95℃变性30s，52℃～55℃退火30s，72℃延伸40s～1min，32～35个循环，最后再72℃延伸5～10min。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)中，PCR反应结束后以1％琼脂糖凝胶电泳、Goldview核酸染料染色、荧光成像系统检测，PCR产物纯化回收后进行测序。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于广东省农业科学院植物保护研究所，未经广东省农业科学院植物保护研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201910311739.7/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
