[发明专利]3,5-双(2,4-二甲氧基苯基)吡啶二元环、其制备方法及应用

说明书

本发明涉及一种3,5‑双（2,4‑二甲氧基苯基）吡啶二元环、其制备方法及应用，该化合物结构式为：。本发明所述的新型大环分子核酸染料具有黄绿色荧光，响应快，稳定性好，细胞毒性低，灵敏度高，可用作于核酸标记的荧光染料。其可以标记双链DNA和单链DNA，并且标记后的单链DNA在529nm和626nm的荧光强度差别不到10％，而标记后的双链DNA在529nm和626nm的荧光强度差别较大，可用于区分双链和单链DNA。

技术领域

本发明涉及一种新型大环主体核酸染料的制备方法，以及该化合物在核酸标记领域的应用，特别是一种水溶性阳离子甲基化3,5-双(2,4-二甲氧基苯基)吡啶二元环、其制备方法及应用。

背景技术

近年来，分子识别研究在化学、生物学、材料科学、环境科学等领域得到了广泛的应用，并吸引了众多科研工作者加入。在此领域已涌现出许多富有创造性的学术成果，其中一个重要的方向就是超分子大环主体在生物化学过程中的应用。而由于大部分生物化学过程发生在水媒介中，所以水溶性大环主体的合成及研究工作有重要意义。

线粒体、高尔基体、细胞核、细胞质这些都是细胞内的物质,这些物质都被细胞膜和细胞壁保护着的,染料是不能进入。一般的生物材料不能穿透细胞膜，只有当细胞被固定后，细胞膜被破坏，染料才能进入细胞内部。但是，有一些染料，俗称活体染料，却能进入活细胞，它们是一些无毒或毒性很小的染色剂，能使细胞中某些特定结构着色。活体染料基本上不影响或很少影响细胞的生命活动，因此活体染料的开发是非常有意义的。

核酸作为生命的遗传物质,其结构的完整性决定了细胞是否能够维持正常的生理功能以及细胞的分裂增殖、分化。核酸结构的完整性也同时决定了生命体能否正常地生长发育,生命体繁殖过程中的遗传与变异。DNA分子结构的多样性对其性质以及功能影响甚大。核酸染色在基因工程领域应用非常广泛，结合琼脂糖凝胶电泳可以分离、鉴定DNA片段大小，对于DNA浓度也可以根据荧光激发强度进行半定量。目前，对于凝胶染色的核酸染色剂，溴化乙锭(Ethidium bromide)仍占据主导地位，EB可以结合双链DNA、单链DNA以及RNA，EB结合双链DNA后荧光强度激发比游离凝胶中的EB发出的荧光强度大20～25倍，具备优越的DNA检测能力，在琼脂糖凝胶及聚丙烯酰胺凝胶中可分别检测痕量的双链DNA。但是EB化学毒性大，具有高致癌性，对环境安全有一定的影响。因此开发新的核酸染料是非常有意义的。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一种3,5-双(2,4-二甲氧基苯基)吡啶。

本发明的目的之二在于提供一种3,5-双(2,4-二甲氧基苯基)吡啶二元环。

本发明的目的之三在于提供一种水溶性阳离子甲基化3,5-双(2,4-二甲氧基苯基)吡啶二元环。

本发明的目的之四在于提供该水溶性阳离子甲基化3,5-双(2,4-二甲氧基苯基)吡啶二元环的制备方法

本发明的目的之五在于提供水溶性阳离子甲基化3,5-双(2,4-二甲氧基苯基)吡啶二元环作为核酸染料的应用。

为达到上述目的，本发明采用以下反应机理：

根据上述反应机理，本发明采用如下技术方案：

一种3,5-双(2,4-二甲氧基苯基)吡啶,其特征在于该化合物的结构式为：

一种3,5-双(2,4-二甲氧基苯基)吡啶二元环，其特征在于该化合物的结构式为：

一种水溶性阳离子甲基化3,5-双(2,4-二甲氧基苯基)吡啶二元环，其特征在于该化合物的结构式为：