[发明专利]一种表达热稳定型酪氨酸酚解酶的大肠杆菌及其应用有效
申请号: | 201910313671.6 | 申请日: | 2019-04-18 |
公开(公告)号: | CN109897845B | 公开(公告)日: | 2020-11-03 |
发明(设计)人: | 周景文;堵国成;陈坚;韩红梅;曾伟主 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N9/88 | 分类号: | C12N9/88;C12N15/60;C12N1/21;C12N15/70;C12P13/22;C12R1/19 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 林娟 |
地址: | 214000 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 表达 稳定 酪氨酸 酚解酶 大肠杆菌 及其 应用 | ||
1.一种酪氨酸酚解酶突变体,其特征在于,所述突变体的氨基酸序列为SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示。
2.编码权利要求1所述酪氨酸酚解酶突变体的基因。
3.含权利要求2所述基因的载体或细胞。
4.一种基因工程菌,其特征在于,表达权利要求1所述的酪氨酸酚解酶突变体。
5.如权利要求4所述的基因工程菌,其特征在于,以大肠杆菌为宿主。
6.如权利要求4或5所述的基因工程菌,其特征在于,以pET系列载体为表达载体。
7.一种生产酪氨酸酚解酶的方法,其特征在于,应用权利要求5~6任一所述的基因工程菌进行发酵生产。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述发酵是先在35-38℃下发酵2-4h,再加入诱导剂0.2-0.5mM的IPTG并降温至20-25℃,继续发酵10-14h。
9.一种左旋多巴的全细胞转化制备方法,其特征在于,以权利要求4~6任一所述的基因工程菌为全细胞催化剂,以丙酮酸钠、邻苯二酚、铵盐为底物,进行全细胞转化。
10.权利要求1所述的酶突变体在制备左旋多巴或含左旋多巴的产品中的应用。
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