[发明专利]一种白及愈伤组织的诱导培养方法在审
| 申请号： | 201910314198.3 | 申请日： | 2019-04-18 |
| 公开（公告）号： | CN109874678A | 公开（公告）日： | 2019-06-14 |
| 发明（设计）人： | 徐德林;上官艳妮;李树刚;何毅怀;李林;潘胤池;刘厚伯;李杰 | 申请（专利权）人： | 遵义医科大学 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 重庆强大凯创专利代理事务所(普通合伙) 50217 | 代理人： | 向林 |
| 地址： | 563000 贵*** | 国省代码： | 贵州;52 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 愈伤组织 白及 植物生长调节剂 次生代谢产物 愈伤组织诱导 继代培养 悬浮培养 诱导培养 二氯苯氧乙酸 愈伤组织细胞 苄氨基嘌呤 药物研究 最佳条件 萘乙酸 减小 中药材 分化 生长 群体 应用 生产 研究 | ||
1.一种白及愈伤组织的诱导培养方法，包括对白及种子的愈伤组织诱导培养和对愈伤组织的继代培养，其特征在于，所述愈伤组织诱导培养和所述继代培养均采用悬浮培养的方式，且均使用含有植物生长调节剂的MS液体培养基。
2.根据权利要求1所述的一种白及愈伤组织的诱导培养方法，其特征在于，所述植物生长调节剂包括了6-苄氨基嘌呤、2,4-二氯苯氧乙酸和萘乙酸三种物质组成的混合物。
3.根据权利要求2所述的一种白及愈伤组织的诱导培养方法，其特征在于，6-苄氨基嘌呤在MS液体培养基中的含量为：0.300-1.000mg/L；2,4-二氯苯氧乙酸在MS液体培养基中的含量为：1.270-2.000mg/L；萘乙酸在MS液体培养基中的含量为：0.262-1.000mg/L。
4.根据权利要求3所述的一种白及愈伤组织的诱导培养方法，其特征在于，所述MS液体培养基含有20-30g/L的蔗糖。
5.根据权利要求1-4中任一项权利要求所述的一种白及愈伤组织的诱导培养方法，其特征在于，在所述愈伤组织诱导培养和所述继代培养中，MS液体培养基的pH为5.8-6.0。
6.根据权利要求5所述的一种白及愈伤组织的诱导培养方法，其特征在于，在所述愈伤组织诱导培养和所述继代培养中，培养条件均为暗培养，23-27℃的培养温度，100-120r/min的转速。
7.根据权利要求1-4，6中任一项权利要求所述的一种白及愈伤组织的诱导培养方法，其特征在于，在愈伤组织诱导培养之前设有前处理步骤，所述前处理步骤为：获取白及种子，并对白及种子进行消毒处理。
8.根据权利要求7所述的一种白及愈伤组织的诱导培养方法，其特征在于，所述消毒处理为对白及种子按如下顺序进行消毒操作：酒精消毒，无菌水冲洗，用氯化汞溶液进行消毒，无菌水冲洗，用无菌吸水纸吸干白及种子表面水分。
9.根据权利要求1-4、6、8中任一项权利要求所述的一种白及愈伤组织的诱导培养方法，其特征在于，所述愈伤组织诱导培养的培养时间为30-50天。
10.根据权利要求1-4、6、8中任一项权利要求所述的一种白及愈伤组织的诱导培养方法，其特征在于，在所述继代培养中，每隔15-35天将原MS液体培养基更换为新鲜的MS液体培养基。
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