[发明专利]快速检测葡萄球菌MecA的试剂盒及方法有效
| 申请号： | 201910319667.0 | 申请日： | 2019-04-19 |
| 公开（公告）号： | CN110029182B | 公开（公告）日： | 2020-06-23 |
| 发明（设计）人： | 李一荣;娄宁;叶光明;周俊英;方芳;赵瑾;李雪寒;曾晓娇;熊梦园;付宇;杨京冬;姜湘湖;刘奕 | 申请（专利权）人： | 武汉大学 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6806;C12Q1/14;C12Q1/6865;C12R1/44 |
| 代理公司： | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人： | 艾小倩 |
| 地址： | 430072 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 快速 检测 葡萄球菌 meca 试剂盒 方法 | ||
1.一种快速检测葡萄球菌MecA的试剂盒，包括细胞裂解液、扩增反应液、胶体金检测液和免疫层析试剂条，其特征在于：其中MecA的转录产物和16SrRNA由扩增反应液中的引物对经NASBA扩增获得：
RNAMecA扩增引物：
MecA-F1，TCTATTAACTGATGGTATGC
MecA-T7-R，AATTCTAATACGACTCACTATAGGGAGAGGAGCCATTCCTTTATCTTGTA；
16S rRNA扩增引物：
SP-16S-F1，GCTTGCTTCTCTGATGTTAG；
SP-16S-R，AATTCTAATACGACTCACTATAGGGAGAGGGCAGCGCGGATCCATCTATA；
得到的扩增产物通过与下述胶体金检测液中的探针对结合来检测NASBA扩增产物：
MecA的CES系列探针：
MecA-CES1，AACAAGTCGTAAATAAAACACATAA-ACGGACACTACGAGTTTGGGTC
MecA-CES2，AGAAGATATTTATAGATCTTATGCA-ACGGACACTACGAGTTTGGGTC；
MecA的LES系列探针：
MecA-LES1，
AATCCCGTGTTCCCGTAGCACG-AACTTAATTGGCAAATCCGGTACTG-GCCTCAAAGACGGACGCCTTCT
MecA-LES2，
AATCCCGTGTTCCCGTAGCACG-CAGAACTCAAAATGAAACAAGGAGAT-GCCTCAAAGACGGACGCCTTCT
MecA-LES3，
AATCCCGTGTTCCCGTAGCACG-AACTGGCAGACAAATTGGGTGGTTT-GCCTCAAAGACGGACGCCTTCT；
16S rRNA的CES系列探针：
SP-16S-CES1，CGGCGGACGGGTGAGTAA-ATCGACCTAGCAATAGCGTACT
SP-16S-CES2，CACGTGGATAACCTACCT-ATCGACCTAGCAATAGCGTACT；
16S rRNA的LES系列探针：
SP-16S-LES1，
AATCCCGTGTTCCCGTAGCACG-ATAAGACTGGGATAACTT-GCCTCAAAGACGGACGCCT
SP-16S-LES2，
AATCCCGTGTTCCCGTAGCACG-CGGGAAACCGGAGCTAAT-GCCTCAAAGACGGACGCCT
SP-16S-LES3，
AATCCCGTGTTCCCGTAGCACG-ACCGGATAATATTTTGAA-GCCTCAAAGACGGACGCCT；
所述免疫层析试剂条包被下述探针检测NASBA扩增产物：
M线捕获探针，GACCCAAACTCGTAGTGTCCGT-GACCCAAACTCGTAGTGTCCGT；
16s线捕获探针，AGTACGCTATTGCTAGGTCGAT-AGTACGCTATTGCTAGGTCGAT；
C线捕获探针，CGTGCTACGGGAACACGGGATT-CGTGCTACGGGAACACGGGATT。
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