[发明专利]一种腹泻性贝毒大田软海绵酸荧光检测试纸及其检测方法

说明书

本发明属于食品安全免疫学检测技术领域，具体涉及一种腹泻性贝毒大田软海绵酸荧光检测试纸及其检测方法。所述试纸包括底板，所述底板上从左到右依次固接有加样垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述硝酸纤维素膜上从左到右依次设置有检测带和参照带；所述检测带由大田软海绵酸‑蛋白质偶联复合物喷射在所述硝酸纤维素膜上干燥后形成；所述参照带由抗小鼠二抗喷射在所述硝酸纤维素膜上，干燥后形成。本发明提供的试纸及检测方法能快速、灵敏地检测出海产样品中的大田软海绵酸的含量水平，适用于大量样本毒素的安全筛查，从而为海产品食用安全提供快速检测试剂。

技术领域

本发明属于食品安全免疫学检测技术领域，具体涉及一种腹泻性贝毒大田软海绵酸荧光检测试纸及其检测方法。

背景技术

大田软海绵酸(Okadaic acid,OA)，是海洋腹泻性贝毒(Diarrhetic ShellfishPoisoning，DSP)的主要致病因子，由有毒赤潮鳍藻属和原甲藻属的一些藻类产生，属于一类脂溶性多环醚类有毒生物活性物质，可通过食物链在贝、螺、蛤等海洋滤食性生物体内富集，使毒性放大，毒素性质非常稳定，一般蒸、煮、炒等加工处理不能将其破坏，由误食有毒海产品而引发中毒的事件时有发生，毒素对机体具有致癌、致畸、致突变等毒性作用。已证实OA是蛋白磷酸酶的强烈抑制剂，可与细胞膜上蛋白磷酸酶(PP2A)结合，具有强烈的促肿瘤和致癌作用。常见的急性中毒症状包括绞痛，寒颤，恶心，呕吐，腹泻，易与细菌性胃肠炎混淆。虽尚未见人类因OA中毒而致死的报道，但在所有海洋毒素中，腹泻性贝毒在全球沿岸海域均有分布，因其分布范围最广，发病率最高，且中毒后无特效药救治，成为世界范围内对人类健康具有最严重威胁的赤潮藻毒素之一。

近年来，中国部分海域的腹泻性贝类毒素调查显示，部分可食用的贝、螺类等已经受到了腹泻性贝毒不同程度的污染，如辽东湾、莱州湾、舟山、大连、岱山、象山、台州、北海、湛江、海口等地的海产品均检出不同污染水平的OA及其它DSP毒素，尤其是在夏秋季节，污染普遍，而且很多种类毒素含量超出国家食用标准。有关腹泻性贝毒中毒事件也时有报道，2011年上半年中国东海宁德发生过食用紫贻贝引起腹泻性贝毒中毒事件，2012年上半年辽宁辽宁省个别地区再次出现食用织纹螺中毒事件，且同年7月，温州发生21起因食用织纹螺引起的食物中毒事件死亡1例。可见腹泻性贝毒引起的食源性污染需引起卫生部门的注意。预防中毒的关键主要是保证食品安全，开展其快速检测对人们的生命安全至关重要。

目前，国家质检行业采用的方法主要为小鼠生物法、化学仪器法，小鼠生物法因周期长，个体差异大，不可重复等弊端，且因动物福利的逐步提升而逐渐受到动物保护组织的反对，限制了方法的实际应用；化学仪器方法主要是HPLC，HPLC-MS等，所需仪器设备昂贵，对操作人员要求高，不便于基层推广使用。

发明内容

本发明的目的是提供一种腹泻性贝毒大田软海绵酸荧光检测试纸及其检测方法，能快速、灵敏地检测出海产样品中的大田软海绵酸的含量水平，适用于大量样本毒素的安全筛查，从而为贝类海产品食用安全提供快速检测试剂。

本发明提供的一种腹泻性贝毒大田软海绵酸荧光检测试纸，包括底板，所述底板上从左到右依次固接有加样垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述加样垫靠近所述硝酸纤维素膜的一端叠加且固接在所述硝酸纤维素膜一端上，所述吸水垫靠近所述硝酸纤维素膜的一端叠加且固接在所述硝酸纤维素膜的另一端上，所述硝酸纤维素膜上从左到右依次设置有检测带和参照带；

所述检测带由大田软海绵酸-蛋白质偶联复合物喷射在所述硝酸纤维素膜上，干燥后形成；所述参照带由抗小鼠二抗喷射在所述硝酸纤维素膜上，干燥后形成；

所述大田软海绵酸-蛋白质偶联复合物是将大田软海绵酸与蛋白质偶联后得到的，所述蛋白质为人免疫球蛋白hIgG或牛血清白蛋白BSA。

优选地，所述的腹泻性贝毒大田软海绵酸荧光检测试纸，干燥温度为10-37℃。