[发明专利]一种植物内生细菌蜡样芽孢杆菌NJSZ-13微生态制剂及其制备方法和应用在审
| 申请号： | 201910331218.8 | 申请日： | 2019-04-23 |
| 公开（公告）号： | CN109868252A | 公开（公告）日： | 2019-06-11 |
| 发明（设计）人： | 谈家金;尹艳楠 | 申请（专利权）人： | 南京林业大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;A01N63/02;A01P5/00;C12R1/085 |
| 代理公司： | 南京申云知识产权代理事务所(普通合伙) 32274 | 代理人： | 邱兴天 |
| 地址： | 210037 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 微生态制剂 蜡样芽孢杆菌 细胞悬浮液 喷雾干燥 制备方法和应用 发酵液 种植物 细菌 微生物技术领域 植物内生细菌 细菌存活率 壁材溶液 离心处理 生理盐水 有效控制 含菌量 上清液 活化 发酵 | ||
1.一种植物内生细菌蜡样芽孢杆菌NJSZ-13微生态制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将蜡样芽孢杆菌NJSZ-13进行活化并发酵，得到发酵液；
(2)对发酵液离心处理，弃上清液，得到细胞悬浮液；
(3)将细胞悬浮液分散在生理盐水中并混合均匀，然后与壁材溶液混合，通过喷雾干燥得到微生态制剂；设置喷雾干燥参数：进风口温度为80-120℃，喷雾压力为0.1-0.2MPa，蠕动速度为5-20RPM，喷雾真空度为0.02-0.04MPa；壁材溶液为喷雾保护剂与无菌水的混合物，喷雾保护剂与无菌水的料液比为(0.5-3)∶10。
2.根据权利要求1所述的植物内生细菌蜡样芽孢杆菌NJSZ-13微生态制剂的制备方法，其特征在于，蜡样芽孢杆菌NJSZ-13活化和发酵过程：从冻干保存管接种到试管斜面，培养温度为28℃，时间为24h，再将试管斜面挑取少量菌体到三角摇瓶中，三角摇瓶置于摇床内振荡培养，28℃、200r/min培养10h，然后按照1％的接种量接种到三角摇瓶，28℃、200r/min培养24h。
3.根据权利要求1所述的植物内生细菌蜡样芽孢杆菌NJSZ-13微生态制剂的制备方法，其特征在于，所述发酵液的离心处理条件为在离心机中以7000r/min的转速离心10min。
4.根据权利要求1所述的植物内生细菌蜡样芽孢杆菌NJSZ-13微生态制剂的制备方法，其特征在于，壁材溶液与细胞悬浮液混合前，先在121℃下高压灭菌20min。
5.根据权利要求1所述的植物内生细菌蜡样芽孢杆菌NJSZ-13微生态制剂的制备方法，其特征在于，所述喷雾保护剂为脱脂奶粉、可溶性淀粉、β-环糊精、玉米粉、葡萄糖、L-谷氨酸钠或蔗糖中的任一种。
6.根据权利要求1所述的植物内生细菌蜡样芽孢杆菌NJSZ-13微生态制剂的制备方法，其特征在于，所述微生态制剂为固体颗粒状。
7.根据权利要求1所述的植物内生细菌蜡样芽孢杆菌NJSZ-13微生态制剂的制备方法，所述喷雾干燥的参数设置为进风口温度为105℃，蠕动速度为10RPM，真空度为0.03MPa，喷雾压力为0.1MPa，喷雾保护剂为脱脂奶粉，喷雾保护剂与无菌水的料液比为1∶5。
8.权利要求1～7任一所述的制备方法制备得到的蜡样芽孢杆菌NJSZ-13微生态制剂。
9.权利要求8所述的蜡样芽孢杆菌NJSZ-13微生态制剂在防治松材线虫病中的应用。
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