[发明专利]乳糖代谢相关基因突变位点的检测方法在审

专利信息
申请号: 201910335833.6 申请日: 2019-04-24
公开(公告)号: CN109880901A 公开(公告)日: 2019-06-14
发明(设计)人: 张立波;张宇 申请(专利权)人: 杭州云鼎基因生物科技有限公司
主分类号: C12Q1/6883 分类号: C12Q1/6883;C12Q1/686;C12N15/11
代理公司: 成都顶峰专利事务所(普通合伙) 51224 代理人: 刘林
地址: 310000 浙江省杭州市滨江区长*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 目标片段 乳糖代谢 突变位点 单碱基延伸技术 检测 基因位点 双向延伸 相关基因 单碱基延伸引物 特异性引物组 多重PCR扩增 目标DNA序列 单碱基延伸 安全指导 变异位点 测定目标 临床用药 质谱分析 目标位 再利用 单管 核酸 组对
【权利要求书】:

1.一种乳糖代谢相关基因突变位点的检测方法,其特征在于:通过设计的目标位点特异性引物组的单管多重PCR扩增反应得到目标片段,然后再利用单碱基延伸技术对所述目标片段进行双向延伸,得到等待检测基因位点,最后通过核酸质谱分析等待检测基因位点精确测定目标DNA序列;

其中,所述单碱基延伸技术是采用单碱基延伸引物组对所述目标片段进行双向延伸。

2.根据权利要求1所述的乳糖代谢相关基因突变位点的检测方法,其特征在于,所述目标位点特异性引物组包括:

用于扩增乳糖代谢相关基因MCM6-1片段的特异性引物,该特异性引物的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,该特异性引物的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示;

用于扩增乳糖代谢相关基因MCM6-2片段的特异性引物,该特异性引物的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示,该特异性引物的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。

3.根据权利要求1所述的人类乳糖代谢相关基因突变位点的检测方法,其特征在于,所述单碱基延伸引物组包括:

用于扩增乳糖代谢相关基因MCM6-1片段的单碱基延伸引物,该单碱基延伸引物的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示;

用于扩增乳糖代谢相关基因MCM6-2片段的单碱基延伸引物,该单碱基延伸引物的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示。

4.根据权利要求1-3任一项所述的乳糖代谢相关基因突变位点的检测方法,其特征在于,所述单管多重PCR扩增的反应程序为:95℃2分钟,95℃30秒,56℃20秒,72℃60秒,45循环,72℃5分钟,4℃保存。

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