[发明专利]多管藻丝状无性系育苗方法

权利要求书

1.多管藻丝状无性系育苗方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)无性系构建：在2-3月份，采集多管藻的果孢子、四分孢子和营养体中的一种或几种，培养为丝状无性系；

(2)无性系扩增：在充气状态下，将丝状无性系悬浮培养为絮状的无性系群体；

(3)无性系育苗：在11月下旬，将絮状的无性系群体粉碎为50-100μm的片段，均匀泼洒到网帘上，充气培养10-15天，待幼苗肉眼可见且分布均匀，直立枝长度平均在1mm以上，下海养殖；

所述多管藻为红藻门真红藻纲松节藻科多管藻属的海藻；

步骤(1)中，所述多管藻的果孢子和四分孢子的采集时间为3月份，所述多管藻的营养体采集时间为2月份；

步骤(1)中，由多管藻的果孢子和四分孢子培养为丝状无性系的方法为：将含有繁殖器官的藻体，经清洗，去除藻体表面的杂藻和动物，阴干刺激0.5-1h，诱导孢子释放，然后采用微吸管吸取单个孢子放入装有PES培养液的培养皿中培养，培养条件为：温度15-20℃、光照强度1000～2000lx、光周期12:12h，待孢子附着萌发形成单列丝状体后，剥离并转入底层铺有消毒滤纸的培养皿中，继续培养形成丝状无性系，每10-15天更换一半培养液；

步骤(1)中，由多管藻的营养体培养为丝状无性系的方法为：取藻体的分枝末端，经清洗，镜检确认无杂藻后，切割成5mm以下片段，放入装有PES培养液的培养皿中培养，培养皿的皿底铺设一层消毒滤纸，培养条件为：温度15-20℃、光照强度1000-2000lx、光周期12:12h，每10-15天更换一半培养液，经过15-20天，片段再生形成丝状无性系；

步骤(2)中，所述无性系扩增的具体方法为：将培养皿中培养的丝状无性系转入装有2000ml PES培养液的细口瓶中，充气培养，培养条件为：温度15-20℃、光照强度1000～2000lx、光周期12:12h，每10-15天更换一半培养液，将丝状无性系培养为絮状的无性系群体；

步骤(3)中，所述无性系育苗的具体方法为：在11月下旬，采苗池底预先铺设充气管，间隔10-15cm，网帘折叠为4-6层铺设在充气管的上方，采苗当天加水20cm，施加硝酸钠和磷酸二氢钾至浓度分别为100ppm和10ppm，将絮状的无性系群体粉碎为50-100μm的片段，均匀泼洒到网帘上，充气混匀，充气培养10-15天，培养条件为：温度5-15℃，光照强度3000-5000lx。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，在无性系育苗充气培养期间，每4-6天换水并上下颠倒一次网帘。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述网帘上无性系片段附着密度为平均10-20个片段/显微镜视野，所述显微镜视野为100倍。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述网帘为维尼纶网帘。