[发明专利]多管藻丝状无性系育苗方法

说明书

本发明公开了一种多管藻丝状无性系育苗方法，包括如下步骤：(1)在2‑3月份，采集多管藻的果孢子、四分孢子和营养体中的一种或几种，培养为丝状无性系；(2)在充气状态下，将丝状无性系悬浮培养为絮状的无性系群体；(3)在11月下旬，将絮状的无性系群体粉碎为50‑100μm的片段，均匀泼洒到网帘上，充气培养10‑15天，待幼苗肉眼可见且分布均匀，直立枝长度平均在1mm以上，下海养殖。本发明可用于多管藻属海藻的规模化苗种生产，解决传统育苗方法中存在生产周期长、受季节限制、生产成本过高等缺点和不足。

技术领域

本发明涉及一种基于丝状无性系构建和扩增的育苗方法，可用于多管藻属海藻的苗种生产。

背景技术

多管藻属海藻是目前海洋生物活性研究领域的热点，其提取物具有抗氧化、抗细菌和真菌、抗癌和抗肿瘤等活性，此外，由于藻胶含量较低，藻胆蛋白丰富，所以多管藻是提取藻红蛋白和藻蓝蛋白的理想材料。随着我国海岸工程的开展和沿海富营养化的加剧，底栖海藻正面临栖息地丧失，多样性下降的不利局面，多管藻的生物量正逐年减少，因此，仅靠野外采集，已经无法满足科研和天然产物规模化生产的需要，亟需人工栽培。

关于多管藻的苗种来源，发明专利“多管藻孢子体直接成苗的方法”(授权号CN100566556C)和“多管藻四分孢子成苗的方法”(授权号CN101167439B)公开了两种多管藻的育苗方法，尽管苗种形式不同，但这两种方法都是依赖于海区的自然藻体作为种源，受季节限制，且采苗后需要在育苗室中进行较长的度夏培育，育苗效率低、成本高，不利于推广。

发明内容

针对上述问题，本发明的目的是建立一种多管藻丝状无性系育苗方法，是一种基于丝状无性系构建和扩增的多管藻育苗方法，可用于多管藻属海藻的规模化苗种生产，解决以往育苗方法中存在生产周期长、受季节限制、生产成本过高等问题。

本发明的目的通过以下技术方案来实现：多管藻丝状无性系育苗方法，包括如下步骤：

(1)无性系构建：在2-3月份，采集多管藻的果孢子、四分孢子和营养体中的一种或几种，培养为丝状无性系；

(2)无性系扩增：在充气状态下，将丝状无性系悬浮培养为絮状的无性系群体；

(3)无性系育苗：在11月下旬，将絮状的无性系群体粉碎为50-100μm的片段，均匀泼洒到网帘上，充气培养10-15天，待幼苗肉眼可见且分布均匀，直立枝长度平均在1mm以上，下海养殖。

本发明所述的充气培养均为充空气培养。

进一步，所述多管藻为红藻门真红藻纲松节藻科多管藻属的海藻。

进一步，步骤(1)中，所述多管藻的果孢子和四分孢子的采集季节是在3月份，由多管藻的果孢子和四分孢子培养为丝状无性系的方法为：将含有繁殖器官的藻体，经清洗，去除藻体表面的杂藻和动物，阴干刺激0.5-1h，诱导孢子释放，再将单个孢子放入装有PES培养液的培养皿中培养，培养条件：温度15-20℃、光照强度1000-2000lx、光周期12:12h，待孢子附着萌发形成单列丝状体后，剥离并转入底层铺有消毒滤纸的培养皿中，继续培养形成丝状无性系，每10-15天更换一半培养液。

进一步，步骤(1)中，所述多管藻的营养体的采集季节是在2月份，由多管藻的营养体培养为丝状无性系的方法为：取藻体的分枝末端，经清洗，镜检确认无杂藻后，切割成5mm以下片段，放入装有PES培养液的培养皿(皿底铺设一层消毒滤纸)中培养，培养条件同上(培养条件为：温度15-20℃、光照强度1000-2000lx、光周期12:12h，每10-15天更换一半培养液)，经过15-20天，片段再生形成丝状无性系。