[发明专利]检测核酸片段长度的方法

权利要求书

1.一种检测核酸片段长度的方法，其特征在于，所述方法包括：

将待检测核酸稀释至预定浓度；

分别取等量体积的稀释至预定浓度的核酸与梯度倍数用量的磁珠结合；所述磁珠是可吸附核酸的表面具有羧基修饰的磁珠；所述磁珠存在于含有聚乙二醇和盐离子的溶液体系中；所述盐离子是由氯化钠提供的离子，所述溶液体系中聚乙二醇浓度范围是10％-30％(w/v)，所述氯化钠的浓度范围是0.1-1mol/L；

通过磁力装置吸附结合了核酸的磁珠，并去除上清；

使用所述等量体积的洗脱缓冲液回溶磁珠上结合的核酸，并检测回溶核酸浓度；

根据所述预定浓度和所述回溶核酸浓度计算核酸与磁珠结合前后的浓度差异，并形成所述浓度差异与磁珠梯度倍数用量之间的曲线关系；

将所述曲线关系与标准品曲线进行比对得到待检测核酸的片段长度，其中所述标准品曲线包括所述预定浓度的不同片段长度的核酸标准品与所述梯度倍数用量的磁珠结合前后的浓度差异与磁珠梯度倍数用量之间的对应关系。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待检测核酸是核酸文库。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述预定浓度是0.1～0.3ng/μL。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述预定浓度是0.2ng/μL。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述梯度倍数用量包括0.1X、0.3X、0.5X、0.7X、0.9X、1X、1.3X、1.5X、1.7X和2X共10个梯度倍数用量。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述等量体积是2～10μL。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述等量体积是5μL。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述核酸标准品的片段长度分别是100bp、200bp、300bp、400bp、500bp、600bp和700bp。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待检测核酸和核酸标准品与每个梯度倍数用量的磁珠结合至少平行进行三个重复。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述核酸的浓度通过数字化多功能酶标仪检测；所述磁力装置是磁力架。

11.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述标准品曲线通过如下方法得到：

将不同片段长度的核酸标准品稀释至所述预定浓度；

分别取等量体积的稀释至所述预定浓度的核酸标准品与所述梯度倍数用量的磁珠结合；

通过磁力装置吸附结合了核酸标准品的磁珠，并去除上清；

使用所述等量体积的洗脱缓冲液回溶磁珠上结合的核酸标准品，并检测回溶核酸标准品浓度；

根据所述预定浓度和所述回溶核酸标准品浓度计算核酸标准品与磁珠结合前后的浓度差异，并形成所述浓度差异与磁珠梯度倍数用量之间的曲线关系。