[发明专利]一种复合生物活性因子的提纯浓缩方法及其浓缩液

权利要求书

1.一种复合生物活性因子的提纯浓缩方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1，将含有复合生物活性因子的生物组织培养液加入有机溶剂，并持续搅拌至均匀，得到生物组织混合液；

S2，将S1得到的生物组织混合液放入至压力处理机内，进行升压处理，加压至120MPa～700MPa，并保持5～10分钟后，快速卸压至常压，并取出生物组织混合液；

S3，将S2取出的生物组织混合溶液加入到离心机内，进行离心处理，离心完成后，经100nm的过滤介质进行过滤处理，除去生物组织混合溶液内的残留的生物组织杂质，得到生物组织混合溶液的澄清液；

S4，将S3得到的生物组织混合溶液的澄清液取出，并使用超滤膜过滤掉澄清液中的分子量大于3000～5000道尔顿的有机大分子物质，得到含有活性因子的生物组织的超滤液；

S5，将S4得到的超滤液经纳滤技术进行分浓缩处理，以除去超滤液中含有的有机溶剂，并将超滤液进行再一次的提纯浓缩，得到含有复合生物活性因子的浓缩液。

2.根据权利要求1所述的一种复合生物活性因子的提纯浓缩方法，其特征在于：所述复合生物活性因子包括：人表皮生长因子HEGF、血管内皮生长因子VEGF、成纤维细胞生长因子FGF、转化生长因子～β1TGF～β1、转化生长因子～β2TGF～β2、类胰岛素一号增长因子IGF～1、类胰岛素二号增长因子IGF～2、角质细胞生长因子KGF、血小板衍生生长因子PDGF、红细胞生长素EPO、集落刺激因子CS和白细胞介素类生长因子。

3.根据权利要求1所述的一种复合生物活性因子的提纯浓缩方法，其特征在于：S1中，所述生物组织培养液为冷冻的含有复合生物活性因子的组织条件培养液，经化冻后使用。

4.根据权利要求1所述的一种复合生物活性因子的提纯浓缩方法，其特征在于：S1中，有机溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇、正丁醇、丙酮、乙酸甲酯和乙酸乙酯中的任一种或多种组合。

5.根据权利要求1所述的一种复合生物活性因子的提纯浓缩方法，其特征在于：S2中，升压处理的时间控制在2～5min，卸压的时间控制在5～10s内。

6.根据权利要求1所述的一种复合生物活性因子的提纯浓缩方法，其特征在于：S3中，生物组织混合溶液在离心机内的离心转速为5000rpm～7000rpm，离心时间为10～20min。

7.根据权利要求1所述的一种复合生物活性因子的提纯浓缩方法，其特征在于：S5中，所述的纳滤膜根据S4中超滤液中有机溶剂分子量的不同选择300～600道尔顿的纳滤膜。