[发明专利]一种复合生物活性因子的提纯浓缩方法及其浓缩液

说明书

本发明公开了一种复合生物活性因子的提纯浓缩方法及其浓缩液，将含有复合生物活性因子的生物组织培养液加入有机溶剂，并持续搅拌至均匀，得到生物组织混合液，将得到的生物组织混合液放入至压力处理机内，进行升压处理，快速卸压至常压，并取出生物组织混合液，进行离心处理，离心完成后，进行过滤处理，除去生物组织混合溶液内的残留的生物组织杂质，得到生物组织混合溶液的澄清液，并使用超滤膜过滤掉澄清液，得到含有活性因子的生物组织的超滤液，并将超滤液进行再一次的提纯浓缩，得到含有复合生物活性因子的浓缩液。该复合生物活性因子的提纯浓缩方法及其浓缩液，对皮肤术后可以加速修复，并具有抚平细纹，延缓皮肤老化等功能。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种复合生物活性因子的提纯浓缩方法及其浓缩液。

背景技术

活性因子，也称生长因子，活性生长因子，活性细胞因子，是一类通过与特异的、高亲和的细胞膜受体结合，调节细胞生长与其他细胞功能等多效应的多肽类物质。活性因子是具有调节细胞生长与分化功能的多种氨基酸的组合体，也称为“肽”，肽是精准的蛋白质片断，故活性因子又叫做活性蛋白因子，分布在人体各组织内，主要存在于血小板和各种成体与胚胎组织及大多数培养细胞中。含量极其少但是对人体细胞调节功能却非常重要，从分子结构来看，细胞活性因子都是小分子的多肽，多数由100个左右氨基酸组成。

随着社会的发展，复合活性因子在医疗和护肤上方的使用越来越高，而含有复合活性因子的浓缩液的提取浓缩与制备，一般需要对含有复合活性因子的组织培养液进行浓缩提取，而现有的浓缩提取方法，其浓缩提取的成本高，效率低，且在提取的过程中无法保证复合活性因子的有效活性，利用率差。

发明内容

本发明的目的在于提供一种复合生物活性因子的提纯浓缩方法及其浓缩液，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种复合生物活性因子的提纯浓缩方法，包括以下步骤：

S1，将含有复合生物活性因子的生物组织培养液加入有机溶剂，并持续搅拌至均匀，得到生物组织混合液；

S2，将S1得到的生物组织混合液放入至压力处理机内，进行升压处理，加压至120MPa～700MPa，并保持5～10分钟后，快速卸压至常压，并取出生物组织混合液；

S3，将S2取出的生物组织混合溶液加入到离心机内，进行离心处理，离心完成后，经100nm的过滤介质进行过滤处理，除去生物组织混合溶液内的残留的生物组织杂质，得到生物组织混合溶液的澄清液；

S4，将S3得到的生物组织混合溶液的澄清液取出，并使用超滤膜过滤掉澄清液中的分子量大于3000～5000道尔顿的有机大分子物质，得到含有活性因子的生物组织的超滤液；

S5，将S4得到的超滤液经纳滤技术进行分浓缩处理，以除去超滤液中含有的有机溶剂，并将超滤液进行再一次的提纯浓缩，得到含有复合生物活性因子的浓缩液。

优选的，所述复合生物活性因子包括：人表皮生长因子HEGF、血管内皮生长因子VEGF、成纤维细胞生长因子FGF、转化生长因子～β1TGF～β1、转化生长因子～β2TGF～β2、类胰岛素一号增长因子IGF～1、类胰岛素二号增长因子IGF～2、角质细胞生长因子KGF、血小板衍生生长因子PDGF、红细胞生长素EPO、集落刺激因子CS和白细胞介素类生长因子。

优选的，S1中，所述生物组织培养液为冷冻的含有复合生物活性因子的组织条件培养液，经化冻后使用。

优选的，S1中，有机溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇、正丁醇、丙酮、乙酸甲酯和乙酸乙酯中的任一种或多种组合。

优选的，S2中，升压处理的时间控制在2～5min，卸压的时间控制在5～10s内。