[发明专利]一种蔗糖-葡萄糖-果糖含量测定试剂盒及其测定方法

说明书

本发明涉及糖含量测定技术领域，且公开了一种蔗糖‑葡萄糖‑果糖含量测定试剂盒及其测定方法。该蔗糖‑葡萄糖‑果糖含量测定试剂盒及其测定方法，包括试剂盒体、试剂管、活动连接装置、密封盖和锁定装置，试剂盒体的内部固定安装有试剂管，试剂盒体的右侧固定安装有活动连接装置，活动连接装置的右端固定安装有密封盖。该蔗糖‑葡萄糖‑果糖含量测定试剂盒及其测定方法，利用特异性酶分别作用于蔗糖、葡萄糖和果糖，排除样本里面其他物质的背景干扰，检测结果更加精确，而且可一次性检测得出这三个糖数据，缩短实验操作时间以及由于分批检测引起的人为误差，为大量样本检测提供一个省时，省钱且无毒的检验手段。

技术领域

本发明涉及糖含量测定技术领域，具体为一种蔗糖-葡萄糖-果糖含量测定试剂盒及其测定方法。

背景技术

目前国内检测蔗糖、葡萄糖和果糖的生化方法大多数是传统的酸水解法，最后与蒽酮或间苯二酚等化学试剂发生显色反应，但这些普通的化学显色试剂灵敏度和特异性较低，并且会出现高的背景值，造成测出来的值偏高，另外，检测过程涉及到强酸如浓硫酸，操作不当会对人体有一定的危害。

另外一种方法是用高效液相色谱仪(HPLC)检测，且需要昂贵的示差检测器，从准备样本到得出三个糖(蔗糖、葡萄糖和果糖)所需用时较长。该方法所用的仪器，耗材和试剂成本较高，一般实验室较难实现，且对于大批量样本的实验筛查无论从时间还是试剂成本都较难以接受。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供了一种蔗糖-葡萄糖-果糖含量测定试剂盒及其测定方法，具备操作过程简便环保；实验结果更精确；一个试剂盒可得到三个糖(蔗糖、葡萄糖和果糖)含量，提高实验效率等优点，解决了常用的检测方法容易出现误差，成本较高的问题。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种蔗糖-葡萄糖-果糖含量测定试剂盒，包括试剂盒体、试剂管、活动连接装置、密封盖和锁定装置，所述试剂盒体的内部固定安装有试剂管，所述试剂盒体的右侧固定安装有活动连接装置，所述活动连接装置的右端固定安装有密封盖，所述密封盖的右端表面及试剂盒体的表面固定安装有锁定装置。

所述锁定装置包括限位块、固定杆、锁定块、活动卡杆和复位弹簧，所述密封盖的右端固定安装有限位块，所述限位块的内部活动连接有固定杆，所述试剂盒体的左侧固定安装有锁定块，所述锁定块的内部活动连接有活动卡杆，所述活动卡杆相对的一侧均固定安装有复位弹簧。

进一步的，所述活动连接装置包括圆杆固定块、圆杆以及旋转块，试剂盒体的右侧固定安装有圆杆固定块，圆杆固定块相对的一侧固定安装有圆杆，圆杆的表面活动连接有旋转块。

进一步的，所述锁定块的内部固定安装有销钉，活动卡杆通过销钉与锁定块活动连接。

进一步的，所述锁定块的内部固定安装有弹簧固定块，且复位弹簧固定安装在弹簧固定板的两侧。

一种蔗糖-葡萄糖-果糖含量测定方法，包括以下步骤：

一：样本制备：取约0.2g样本，加1mL的蒸馏水研磨，粗提液全部转移到EP管中，12000rpm，常温离心10min，上清液待测。

二：检测步骤：

1)、紫外分光光度计预热30min以上，调节波长到340nm，蒸馏水调零。

2)、取四个1mL石英比色皿：蔗糖测定管：依次加入25μL样本，25μL蔗糖酶(10U)，25μLNADP⁺(5mM)和600μL磷酸缓冲液；蔗糖对照管：依次加入25μL蔗糖酶(10U)，25μLNADP⁺(5mM)和625μL磷酸缓冲液；果糖和葡萄糖测定管：依次加入25μL样本，25μLNADP⁺和600μL磷酸缓冲液；果糖和葡萄糖对照管：25μLNADP⁺和625μL磷酸缓冲液；上述四管依次加完试剂混匀后，静置2min后于340nm处读取各管的A1值。