[发明专利]一种淡水鱼类线粒体12S通用宏条形码扩增引物及其应用方法有效
| 申请号： | 201910341512.7 | 申请日： | 2019-04-26 |
| 公开（公告）号： | CN109943645B | 公开（公告）日： | 2023-04-14 |
| 发明（设计）人： | 杨江华;张效伟 | 申请（专利权）人： | 南京易基诺环保科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/6869;C12N15/11 |
| 代理公司： | 江苏瑞途律师事务所 32346 | 代理人： | 陈彬;蒋海军 |
| 地址： | 211100 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 淡水 鱼类 线粒体 12 通用 条形码 扩增 引物 及其 应用 方法 | ||
1.一种淡水鱼类线粒体12S通用宏条形码扩增引物，其特征在于：上游引物为Fish-F4：GTACCTTTTGCATCATGATTTAG；
下游引物为Fish-R4：CCACTCTTTTGCCACAGAGACG。
2.权利要求1所述淡水鱼类线粒体12S通用宏条形码扩增引物的应用方法，其步骤为：
(1)环境DNA样本的提取；
(2)目的片段的扩增：对步骤(1)中的环境DNA样本进行PCR扩增，其中，引物为权利要求1所述引物对；
(3)步骤(2)中扩增产物的片段大小分析及鱼类鉴定分析。
3.根据权利要求2所述的一种淡水鱼类线粒体12S通用宏条形码扩增引物的应用方法，其特征在于：所述步骤(2)中，上游引物与下游引物组合中两者的摩尔比为1:1。
4.根据权利要求2-3任意一项所述的一种淡水鱼类线粒体12S通用宏条形码扩增引物的应用方法，其特征在于：所述步骤(2)中PCR反应的退火温度为50-55℃。
5.根据权利要求4所述的一种淡水鱼类线粒体12S通用宏条形码扩增引物的应用方法，其特征在于：步骤(3)中还包括对扩增产物进行高通量测序。
6.根据权利要求5所述的一种淡水鱼类线粒体12S通用宏条形码扩增引物的应用方法，其特征在于：所述步骤(3)中，Fish-F4与Fish-R4组合引物对的PCR产物长度为80-100bp。
7.权利要求1所述的淡水鱼类线粒体12S通用宏条形码扩增引物在环境源DNA和生物源DNA的PCR扩增中的应用。
8.权利要求1所述的淡水鱼类线粒体12S通用宏条形码扩增引物在鱼类物种鉴定、鱼类多样性、鱼类的进化、系统发育、系统地理学分析中的应用。
9.权利要求1所述的淡水鱼类线粒体12S通用宏条形码扩增引物在鱼类濒危物种和鱼类入侵物种监测中的应用。
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