[发明专利]用于检测对虾杆状病毒的特异性引物对、探针、检测试剂盒在审
| 申请号： | 201910341879.9 | 申请日： | 2019-04-25 |
| 公开（公告）号： | CN110016523A | 公开（公告）日： | 2019-07-16 |
| 发明（设计）人： | 刘训猛;方苹;于继彬;贡成良;高山珊;陈静 | 申请（专利权）人： | 江苏省渔业技术推广中心;苏州先达基因科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 王艳 |
| 地址： | 210000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 检测 对虾杆状病毒 特异性引物 恒温扩增 探针 引物 假阳性结果 产物电泳 检测试剂 探针组合 验证过程 仪器设备 准确度 便捷性 试剂盒 种检测 准确率 靶点 节约 | ||
1.一种用于检测对虾杆状病毒的特异性引物对，其特征在于，所述引物对包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：5或SEQ ID NO：7所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：2 或SEQ ID NO：4 或SEQID NO：6或SEQ ID NO：8所示。
2.与权利要求1所述的引物对配合使用的探针，其特征在于，所述探针的核苷酸序列如SEQ ID NO：9 或SEQ ID NO：10或SEQ ID NO：11所示。
3.根据权利要求2所述的探针，其特征在于，所述探针为荧光染料标记的探针，所述荧光染料为SYTO-13，SYTO-82， FAM，FITC, SYBR Green I，SYTO-13，SYTO-82，VIC，HEX，JOE，TAMRA，TET，Cy3 ，ROX，TEXAS-Red或Cy5中的一种。
4.权利要求1所述的特异性引物对、权利要求2所述的探针在制备对虾杆状病毒检测或诊断试剂盒中的应用。
5.一种对虾杆状病毒的检测试剂盒，其特征在于，所述对虾杆状病毒的检测试剂盒包括权利要求1所述的引物对和/或权利要求2~3任一项所述的探针。
6.根据权利要求5所述的对虾杆状病毒的检测试剂盒，其特征在于，所述的检测试剂盒反应体系包括：重组酶，聚合酶，单链DNA结合蛋白，核酸酶，至少一对引物，一条探针，dNTP、拥挤试剂、重组加载蛋白、能量系统和盐离子。
7.根据权利要求6所述的对虾杆状病毒的检测试剂盒，其特征在于，所述重组酶选自噬菌体UvsX 蛋白，大肠杆菌recA蛋白的任一种或一种以上的组合。
8.根据权利要求6所述的对虾杆状病毒的检测试剂盒，其特征在于，所述核酸酶选自核酸外切酶III，核酸内切酶IV的任一种或一种以上的组合。
9.根据权利要求6所述的对虾杆状病毒的检测试剂盒，其特征在于，所述拥挤试剂为聚乙二醇，所述聚乙二醇选自PEG1450，PEG3000，PEG8000，PEG10000，PEG14000， PEG20000，PEG25000，PEG30000，PEG35000或PEG40000中的一种或几种。
10.根据权利要求7所述的对虾杆状病毒的检测试剂盒，其特征在于，所述能量系统选自ATP、磷酸肌酸、肌酸激酶的一种或一种以上的组合。
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