[发明专利]一种基于氧杂蒽和香豆素的区分过氧化亚硝基和次氯酸根荧光探针的制备方法

说明书

本发明公开了一种基于氧杂蒽和香豆素的区分过氧化亚硝基和次氯酸根荧光探针的制备方法。本发明采用氧杂蒽和香豆素二联体作为荧光母体，分别在香豆素母体上引入与过氧化亚硝基特异性反应的二苯基次膦酰氯和在氧杂蒽引入与次氯酸根特异性反应的含硫五元环，当过氧化亚硝基和次氯酸根单独存在或同时存在条件下，在不同的激发波长下发射不同的荧光。该荧光探针能够实现对过氧化亚硝基和次氯酸根的高选择性、高灵敏度检测，在活性小分子检测领域具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明涉及有机小分子荧光探针领域，尤其是涉及一种基于氧杂蒽和香豆素的区分过氧化亚硝基和次氯酸根荧光探针的制备方法。

背景技术

过氧化亚硝基和次氯酸根都属于活性氧物种，他们在生物内广泛存在的重要的生物活性物质，在生命体内广泛存在。过氧化亚硝基(ONOO^-)是一种具有强氧化性短寿命的活性物种，在生命体内主要由一氧化氮(NO)和超氧阴离子反应而产生。次氯酸根(ClO^-)在生命体内主要由髓过氧化物酶的催化作用下，过氧化氢和细胞内的氯离子发生反应生成次氯酸根离子。医学研究表明异常的生理浓度可能会引起疾病，当生命体发生缺血再灌注，体内炎症，发生药物肝损伤，肿瘤等疾病时会引起过氧化亚硝基(ONOO^-)和次氯酸根(ClO-)浓度异常，通过检测生物体内异常的过氧化亚硝基(ONOO^-)和次氯酸根(ClO^-)浓度可以预测特定的疾病。然而，长久以来，检测手段的缺乏阻碍了人们对一在生命体系中作用行为的研究。此前报道的大都为检测单一活性氧物质的，因此，合成具有多检测功能的探针十分有必要。

荧光探针技术作为在分子水平上对研究对象进行研究的分析方法，其开发与利用研究是化学与生物、医学、农业等科学的交叉领域，因其具有选择性好、灵敏度高、操作简便快速、对检测物损伤少等优点已被广泛应用于检测环境和生物体系中的金属阳离子、阴离子、生物体内活性小分子等方面。目前荧光探针已经被广泛应用于环境和生物体中重金属、生物活性小分子等物质的检测。氧杂蒽和香豆素具有较大的摩尔吸光系数、荧光量子产率高、较好的光学稳定性、波长范围宽，生物相容性好等优点已经被广泛的应用于荧光探针的设计与合成。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是针对现有技术的不足，通过分子结构的设计，提供了一种水溶性好，响应快，选择性性好，灵敏度高的识别过氧化亚硝基和次氯酸根的荧光探针分子，解决了目前单一探针分子只能检测过氧化亚硝基和次氯酸根中的一种，区分度不够的问题。

为达到上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种基于氧杂蒽和香豆素的区分过氧化亚硝基和次氯酸根荧光探针，简称为Dual-NC，其结构式如下：

一种基于氧杂蒽和香豆素的区分过氧化亚硝基和次氯酸根荧光探针的制备方法，具体包括如下反应步骤：

(1)化合物a和化合物b在三氟乙酸存在条件下加热反应，反应完全后分离提纯得到化合物1；

(2)化合物1和芴甲氧碳酰氯在无水乙腈中反应，反应结束后分离提纯得化合物2；

(3)化合物2和劳森试剂在无水甲苯中加热反应，反应结束后分离提纯得化合物3；

(4)化合物3在哌啶和乙腈的混合液中搅拌反应，反应结束后分离提纯得化合物4；

(5)化合物4和化合物5在三乙胺存在条件下于二氯甲烷中反应，反应完全后分离提纯得到化合物6；

(6)化合物6与二苯基次膦酰氯在二氯甲烷中反应，反应结束后分离提纯得到荧光探针 Dual-NC；

其反应式如下：