[发明专利]一种同时检测食品中缩水甘油酯和氯丙醇酯的方法

权利要求书

1.一种同时检测食品中缩水甘油酯和氯丙醇酯的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)称取样品并加内标物：称取食用油脂样品溶解，并加入混合内标工作液，得到油脂溶液；

(2)溴代反应：将所述油脂溶液与溴化物-硫酸溶液充分混合并进行溴代反应，加入碱中和反应液后用有机物萃取，收集有机相并浓缩，复溶得到溴代反应液；

(3)酸水解反应：将所述溴代液与硫酸－甲醇溶液充分混合并进行酸水解反应，加入碱中和反应液，得到酸水解反应液；

(4)基质分散固相萃取净化：将所述酸水解液倒入装有硅藻土的固相萃取柱中，淋洗后洗脱，将洗脱液脱水并浓缩，得到净化液；

(5)衍生化反应：将七氟丁酰基化试剂加入所述净化液中，混合均匀并进行衍生化反应，降至室温后将衍生反应液定容，与水充分混合后静置分层，收集有机相溶液得到待测溶液；

(6)检测分析：用气相色谱-三重四级杆串联质谱仪或气相色谱-质谱仪检测所述待测溶液，采用同位素内标标准曲线法定量。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述食品包括食用油脂、奶粉和油脂性食品，当所述食品为奶粉或油脂性食品时，所述同时检测食品中缩水甘油酯和氯丙醇酯的方法还包括所述食品的预处理，所述预处理为脂肪的提取。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述食用油脂的质量为80-120mg，所述油脂溶液的溶剂为四氢呋喃；所述混合内标工作液包括氘代同位素d₅-3-氯-1,2-丙二醇酯、氘代同位素d₅-2-氯-1,3-丙二醇酯、氘代同位素d₅-缩水甘油酯。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中所述溴化物-硫酸溶液的加入量为10-50μL；所述溴代反应的温度45-60℃，所述溴代反应的时间10-25min；所述溴化物-硫酸溶液中溴化物质量浓度为0.5-1.0％，硫酸体积浓度为5-10％；用于萃取的所述有机物为正己烷，所述溴代反应液的溶剂为四氢呋喃。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中所述硫酸－甲醇溶液的加入量为1-2.5mL；所述中酸水解反应的温度30-45℃，所述酸水解反应的时间12-18h；所述硫酸－甲醇溶液中硫酸体积分数为1-3％。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(4)中所述固相萃取柱用正己烷淋洗，用二氯甲烷、无水乙醚或者乙酸乙酯中的一种或多种洗脱。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(5)中所述七氟丁酰基化试剂的加入量为20-100μL，所述七氟丁酰基化试剂为七氟丁酰基咪唑或七氟丁酸酐；所述衍生化反应的温度60-85℃，所述衍生化反应的时间20-45min；所述衍生反应液定容于正己烷、异辛烷或壬烷中。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(6)中所述气相色谱-三重四级杆串联质谱仪或所述气相色谱-质谱仪的气相色谱条件为：色谱柱：弱极性毛细管色谱柱(固定液为5％苯基和95％二甲基聚硅氧烷，30m×0.25mm×0.25μm)；进样口温度260-300℃，程序升温：50℃保持1min，再以3℃/min的速度升至100℃，最后以40℃/min的速度升至300℃，保持3min；载气：高纯氦气，流速0.8-1.0mL/min；碰撞气：高纯氮气；进样方式：不分流进样；进样体积：1.0μL；

所述气相色谱-三重四级杆串联质谱仪的质谱条件为：离子化方式：EI；离子源温度：200-250℃；传输线温度：270-300℃；四级杆温度：130-160℃；溶剂延迟：5.0min；多反应监测模式(MRM)。

所述气相色谱-质谱仪的质谱条件为：离子化方式：EI；离子源温度：200-250℃；传输线温度：270-300℃；四级杆温度：130-160℃；溶剂延迟：5.0min；选择离子监测模式(SIM)。

9.根据权利要求1-8任一项所述的方法，其特征在于，步骤(6)中标准工作曲线的绘制由5-7份混合标准工作液经步骤(2-6)测试分析得到；所述混合标准工作液成分包括：3-氯-1,2-丙二醇酯、2-氯-1,3-丙二醇酯、缩水甘油酯；所述混合标准工作液中各成分浓度在0-3.00mg/kg(以醇计)范围内梯度分布。