[发明专利]双氢青蒿素在制备治疗EMT介导的人肝癌细胞药物中的应用

说明书

本发明公开了一种双氢青蒿素在制备治疗EMT介导的人肝癌细胞药物中的应用。本发明重要之处是发现双氢青蒿素能抑制EMT介导肝癌转移的作用。具体包括双氢青蒿素对人肝癌7402、MHCC97H细胞具有明显增殖抑制作用，在非毒性剂量25μM下可阻滞7402、MHCC97H细胞发生上皮间质转化(EMT)。划痕实验和Transwell迁移实验结果表明：双氢青蒿素明显抑制肝癌7402、MHCC97H细胞迁移作用，并具有良好浓度依赖性；作用机制研究表明：双氢青蒿素可能通过抑制EGFR通路的ERK、AKT、Snail、Slug的表达阻滞肝癌7402、MHCC97H细胞发生EMT。

技术领域

本发明涉及一种抗肿瘤药物，属于生物制药技术领域，具体涉及一种双氢青蒿素在制备治疗EMT介导的人肝癌细胞药物中的应用。

背景技术

据2018年最新数据显示，肝癌发病率排在第五位，死亡率排在第三位，仅次于胃癌和肺癌。我国占世界肝癌发病率的一半以上，大多数病患被发现时已是肝癌晚期。肝癌具有生存率低，复发率高，生存预后差的特点。通过放化疗和手术治疗也不容乐观，其中肿瘤的转移为治疗的难点之一。

80％的恶性肿瘤来源于上皮组织，原发性上皮组织肿瘤细胞通过EMT形成具有迁移能力的间充质细胞。间充质细胞侵袭血管内，并随血流循环转移至不同部位，进而通过EMT形成上皮细胞的肿瘤转移灶。这种间充质细胞保留了上皮细胞的一些特性，形成癌症的包括：肺癌、肠癌、乳腺癌、肾癌、肝癌等。

双氢青蒿素是青蒿素的衍生物，具有抗疟疾的作用，同时也具有抗炎的作用，肿瘤的生长与炎症的作用有关，并且有研究表明双氢青蒿素对于膀胱癌、乳腺癌、肺癌等有一定的治疗效果，能够抑制细胞的生长，促进细胞的凋亡，影响细胞G2/M期等作用。

EMT能够促进肝癌细胞的侵袭和转移，EMT(epithelial-to-mesenchymaltransition)全称是上皮间质转化，是指上皮细胞通过特定程序转化为具有间质表型细胞的生物学过程，EMT在胚胎发育、肿瘤原位侵袭和远端转移中发挥重要作用。E-cadherin水平下降可以导致细胞的粘附力降低，使细胞获得易于侵袭和转移的特性，E-cadherin表达的丢失已经被认为是EMT最显著的特征，同时细胞获得间质表型，如N-cadherin表达升高，且这两个蛋白也是EMT中典型的生物标记物。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种青蒿素衍生物治疗肿瘤候选药物，双氢青蒿素在制备抗肿瘤转移中的应用。

本发明是通过如下技术方案实现的：

本发明提供一种双氢青蒿素在制备治疗EMT介导的人肝癌细胞药物中的应用，含有药学上的治疗有效剂量的双氢青蒿素，所述双氢青蒿素对人肝癌7402、MHCC97H细胞具有明显增殖抑制作用，在非毒性剂量25μM下可阻滞7402、MHCC97H细胞发生上皮间质转化(EMT)。

本发明所述的应用，所述体外实验所用的细胞株为人源肝癌细胞7402、MHCC97H，其中MHCC97H是高转移肝癌细胞株。

本发明所述的应用，所述双氢青蒿素为传统中草药黄花蒿中提取的青蒿素的衍生物，购买于Sigma公司。

本发明所述的应用，所述双氢青蒿素的浓度≥25μM。

本发明所述的应用，所述候选药物可制成片剂，其制备方法为：

1)将双氢青蒿素和淀粉过80目筛；

2)10％淀粉浆的制备：将0.3g枸橼酸溶解于20ml蒸馏水中，再加入2g淀粉分散均匀，加热约80℃使淀粉糊化，冷却至温浆后使用；

3)称取30g双氢青蒿素的细粉于乳钵中，等量分次加入2g淀粉进行研磨，混合均匀，加入适量淀粉浆制备软材；