[发明专利]用于沉默嗜热毁丝霉中腺苷酸环化酶基因的干扰表达载体在审
申请号: | 201910350267.6 | 申请日: | 2019-04-28 |
公开(公告)号: | CN110004146A | 公开(公告)日: | 2019-07-12 |
发明(设计)人: | 王娟;邓婷婷;杨帆;杨扬;蔡湘湘;潘庆;来亚鹏;郑春娟 | 申请(专利权)人: | 深圳大学 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12Q1/6895;C12N15/11;C12N15/80;C12N15/60 |
代理公司: | 厦门原创专利事务所(普通合伙) 35101 | 代理人: | 徐东峰 |
地址: | 518060 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 腺苷酸环化酶 嗜热毁丝霉 表达载体 重组表达载体 退火 基因工程技术 纤维素酶基因 真菌纤维素酶 表达调控 基因干扰 理论基础 原生质体 双酶切 基因 构建 菌株 转入 研究 | ||
1.用于沉默嗜热毁丝霉中腺苷酸环化酶基因的siRNA的DNA模板,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1~2所示。
2.实时荧光定量PCR用于检测嗜热毁丝霉中腺苷酸环化酶基因表达量的引物对,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO:3~8所示。
3.一种用于沉默嗜热毁丝霉中腺苷酸环化酶基因的试剂盒,其特征在于,包括用于沉默嗜热毁丝霉中腺苷酸环化酶基因的siRNA的DNA模板,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1~2所示。
4.如权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,还包括实时荧光定量PCR用于检测嗜热毁丝霉中腺苷酸环化酶基因表达量的引物对,其核苷酸序列如SEQ ID NO:3~8所示。
5.一种腺苷酸环化酶基因干扰表达载体,其特正在于,包括如权利要求1所述的siRNA的DNA模板。
6.如权利要求1所述的腺苷酸环化酶基因干扰表达载体,其特征在于,包括MtPpdc-ac-MtTpdc干扰表达盒,所述MtPpdc-ac-MtTpdc干扰表达盒的核苷酸序列如SEQ ID NO:9所示。
7.如权利要求5或6所述的腺苷酸环化酶基因干扰表达载体的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:Not I酶和Xba I酶切后的pUC19-MtPpdc-MtTpdc质粒和退火后的siRNA的DNA模板采用T4 ligase进行连接。
8.如权利要求5或6所述的腺苷酸环化酶基因干扰表达载体在降低滤纸酶、β-葡萄糖苷酶或内切β-1,4-葡聚糖苷酶的活性中的应用。
9.如权利要求5或6所述的腺苷酸环化酶基因干扰表达载体在降低β-葡萄糖苷酶基因blg2或内切β-1,4-葡聚糖酶基因egl1的表达量中的应用。
10.如权利要求5或6所述的腺苷酸环化酶基因干扰表达载体在降低磷酸二酯酶基因的表达量中的应用。
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