[发明专利]一种检测食用油中菌落总数的方法

权利要求书

1.一种检测食用油中菌落总数的方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：样品处理：取油样于灭菌锥形瓶中，加入灭菌液体石蜡和灭菌吐温80，超声后放入摇床中震荡，制得混合液；

步骤2：乳化：将上步骤1的混合液加入灭菌生理盐水，放入水浴锅中充分乳化；

步骤3：稀释：使用无菌生理盐水将步骤2乳化后的混合液进行系列稀释得到样液；

步骤4：取样和培养：在无菌工作台中，将融化并冷却的培养基倾注到平皿内，待其凝固后取样液均匀涂布在培养基上，置于恒温培养箱中培养；

步骤5：计算：首先选取平均菌落数在30-300之间的平皿，作为菌落总数测定的范围；当只有一个稀释度的平均菌落符合此范围时，以该平均菌落数符合此范围的平皿的菌落数乘以其稀释倍数，得到菌落总数。

2.根据权利要求1所述的一种检测食用油中菌落总数的方法，其特征在于，所述步骤1中油样、灭菌液体石蜡和灭菌吐温80的体积比为0.8～1:1.6～2:0.8～1。

3.根据权利要求1所述的一种检测食用油中菌落总数的方法，其特征在于，所述步骤1中，混合液经超声4-6min处理后，放入40-50℃摇床中震荡混合15-25min。

4.根据权利要求1所述的一种检测食用油中菌落总数的方法，其特征在于，所述步骤2中往混合液加入灭菌生理盐水，混合液与灭菌生理盐水的体积比为0.8～1：2.4～3。

5.根据权利要求4所述的一种检测食用油中菌落总数的方法，其特征在于，所述步骤2中，将混合液加入灭菌生理盐水后，放入40-50℃水浴锅中充分乳化25-35min。

6.根据权利要求1所述的一种检测食用油中菌落总数的方法，其特征在于，所述步骤4与步骤5之间还包括步骤a，步骤a为计数：先用肉眼观察，点数菌落数，然后再用放大镜检查，记下各平皿的菌落数后，求出同一稀释度各平皿的平均菌落数。

7.根据权利要求1所述的一种检测食用油中菌落总数的方法，其特征在于，所述步骤4中，将融化并冷却至45℃-50℃的培养基倾注到平皿内，每皿10-20ml，待其凝固后取样液均匀涂布在培养基上，置于35-42℃恒温培养箱中培养45-51h。

8.根据权利要求1所述的一种检测食用油中菌落总数的方法，其特征在于，所述步骤4中采用营养琼脂培养基，每1000ml营养琼脂培养基中含有蛋白胨20g、牛肉膏3g、氯化钠5g、琼脂15g、卵磷脂1g、吐温80 7g和蒸馏水1000m1，PH值范围为7.1-7.4。

9.根据权利要求8所述的一种检测食用油中菌落总数的方法，其特征在于，所述步骤4的营养琼脂培养基制法为：先将1g卵磷脂加到少量蒸馏水中，加热溶解，加入7g吐温80，再将除琼脂外的其他成分加到其余的蒸馏水中溶解，加入已溶解的卵磷脂、吐温80混匀，调pH值为7.1-7.4，加入琼脂，121℃高压灭菌20min，储存于冷暗处备用。

10.根据权利要求1所述的一种检测食用油中菌落总数的方法，其特征在于，所述食用油采用棕榈油。