[发明专利]一种检测食用油中菌落总数的方法

说明书

本发明公开了一种检测食用油中菌落总数的方法，包括如下步骤：取油样于灭菌锥形瓶中，加入灭菌液体石蜡和灭菌吐温80，超声后放入摇床中震荡混合；将混合液加入灭菌生理盐水，最后将其放入水浴锅中充分乳化；使用无菌生理盐水将乳化后的混合液进行系列稀释得到样液；将融化并冷却的培养基倾注到平皿内，待其凝固后取样液均匀涂布在培养基上，置于恒温培养箱中培养；先用肉眼观察，点数菌落数，求出同一稀释度各平皿的平均菌落数；计算得到菌落总数，本发明可将待测油样均匀分散于灭菌生理盐水中，形成均匀的溶液，有助于准确测定食用油中菌落总数；且选用的培养基，解决了普通的培养基难以满足检测需求的问题，可帮助有效地检测到菌落总数。

技术领域

本发明涉及食用油检测领域，尤其涉及一种检测食用油中菌落总数的方法。

背景技术

菌落总数是指食品检样经过处理后，在一定条件下培养后，所得1mL(或1g)检样形成菌落的总数。菌落总数指的是产品中所有需氧微生物含量的高低，是衡量产品受污染程度的一项重要指标，可以用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量，反映着食品在生产过程中的卫生状况。

食用油中水分含量低，不适合微生物的生长。但是如果食用油在贮藏或使用过程中处理不当，也很容易受到微生物的污染，特别是有明水存在时。在水分足够多的情况下，油脂是能够滋生微生物的，微生物的过度繁殖会产生不良风味，而且不饱和脂肪酸会发生酸败，更容易加速油脂变质。

所以，检测食用油中菌落总数对油脂的贮藏，运输和加工具有重要的指导意义。厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌，由于培养条件不能满足其生理需求，故难以繁殖生长。因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数，而且菌落总数并不能区分细菌的种类。

另一方面，油脂的特性也决定了其微生物检测的难度，通常来说，进行微生物的测定时需要将样品均匀分散于灭菌生理盐水中，形成均匀的溶液，然后再接种于平板上或者进行其他操作。然而食用油不溶于水，所以不能与生理盐水形成均一的分散体系，即与生理盐水形成均匀的稀释液，造成检测无法实施，必须要对其进行乳化。

此外，普通的培养基也很难满足其需求，因此乳化的效果和培养基的选取是食用油中微生物检测的重难点问题。

发明内容

为了克服现有技术中存在的缺点和不足，本发明的目的在于提供一种检测食用油中菌落总数的方法，解决了食用油难以溶于水而无法检测微生物菌落的问题，对油脂中微生物指标的测定具有重要的指导意义。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种检测食用油中菌落总数的方法，包括如下步骤：

步骤1：样品处理：取油样于灭菌锥形瓶中，加入灭菌液体石蜡和灭菌吐温80，超声后放入摇床中震荡混合，得到混合液；选取吐温80和液体石蜡作为乳化的表面活性剂，可增强乳化的效果；

步骤2：乳化：将上步骤1的混合液加入灭菌生理盐水，最后将其放入水浴锅中充分乳化；混合液与生理盐水形成均匀的稀释液，将乳化后油样和生理盐水充分混合，形成均匀的溶液，使油脂中的微生物能均匀的分布于生理盐水中；这样可以使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在，保证检测的准确性；

步骤3：稀释：使用无菌生理盐水将步骤2乳化后的混合液进行10倍的系列稀释得到样液，系列稀释是对乳化后的混合液依次10倍稀释，得到不同稀释度的混合液，用不同浓度的稀释液分别做实验，最后取培养琼脂平板上出现单个的菌落时的浓度进行计数，经过计算，得出菌液含菌量；

步骤4：取样和培养：在无菌工作台中，将融化并冷却的培养基倾注到平皿内，待其凝固后取样液均匀涂布在培养基上，置于恒温培养箱中培养；