[发明专利]俄色果中枸杞酸的提取方法和检测方法

说明书

本发明公开了一种俄色果提取物，俄色果中枸杞酸的制备方法和检测方法。实验结果证明，本发明成功从俄色果中分离出了枸杞酸，其在俄色果中属于首次发现，因此，枸杞酸可用于俄色果的鉴别和质量控制；还可为俄色果的药效作用的挖掘奠定基础。

技术领域

本发明涉及俄色果中枸杞酸的提取方法和检测方法。

背景技术

“俄色”又名“瓦多”(藏语)，来源于蔷薇科苹果属植物变叶海棠Malustoringoides(Rehd.)Hughes及花叶海棠Malus tiansitoria(Batal.)Schneid，其果实具有“健胃、降血压，治肝病、腹泻、眼病、月经不调”等作用，为甘孜州藏区民间常用药，具有悠久的药用和食用历史。现代研究表明俄色果含有丰富的维生素C、维生素B2；果糖、葡萄糖、二糖、多糖等；豆蔻酸、棕榈酸、棕榈烯酸、油酸、亚油酸、亚麻酸等多种脂肪酸及蛋白质等营养成分，但对其理化成分未见较为明确、系统的研究报道。

枸杞酸，英文名：2-O-β-D-Glucopyranosyl-L-ascorbic Acid(AA-2βG)，是一种抗坏血酸的衍生物，易溶于水。枸杞酸在2004年，由日本学者Toyoda-Ono等从宁夏枸杞和北方枸杞的干果中分离纯化得到，是真正意义上源于天然的、稳定的抗坏血酸衍生物，具有与维生素C相当的生物活性，有抗氧化/抗衰老、抗肿瘤发生活性、抗癌细胞的细胞毒性和抗增殖作用、免疫促进、抑制黑素细胞生长，降低细胞黑素合成等作用，在体内具有较高的稳定性，较长的时效和半衰期，因此枸杞酸比较适合作为Vc前体应用于医药、化妆品和食品等领域，其药用价值和商业价值较高。

目前未见俄色果中含有枸杞酸的报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种俄色果提取物，俄色果中枸杞酸的制备方法和检测方法。

本发明首先提供了一种俄色果提取物，所述提取物中枸杞酸的含量为80％以上。

进一步地，所述俄色果是指蔷薇科苹果属植物变叶海棠Malus toringoides及花叶海棠Malus tiansitoria的果实。

进一步地，所述提取物是由下述方法制备得到：

(1)取俄色果，粉碎，水提后，浓缩过滤即得制备液；

(2)取步骤(1)中的制备液，用高效液相色谱制备，采用C18色谱柱，检测波长为235nm，依次以甲醇：0.1％磷酸水＝4:96v/v为洗脱剂，流速0.5～1.0ml/min，进行洗脱，取13-20min的流分即得提取物。

进一步地，步骤(1)中，水提时，所述俄色果与水的质量比为1:10；所述提取为超声提取，提取次数为2次，每次提取时间为1小时。

本发明还提供了一种从俄色果中制备枸杞酸的方法，包括以下步骤：

(1)取俄色果，粉碎，水提后，浓缩过滤即得制备液；

(2)取步骤(1)中的制备液，用高效液相色谱制备，采用C18色谱柱，检测波长为235nm，依次以甲醇：0.1％磷酸水＝4:96v/v为洗脱剂进行洗脱，得样品段；

(3)取步骤(2)所得样品段，再次用高效液相色谱制备精分，得合格段，干燥后即得枸杞酸；

色谱条件如下：

色谱柱：C18色谱柱；

流动相：流动相A为甲醇，流动相B为0.1％磷酸溶液；

洗脱程序：0～15min，1％A；15～25min，1％A→10％A；25～30min，10％A→5％A；30～40min，5％A；40～50min，5％A→1％A；

检测波长：235nm。