[发明专利]含STn或F-STn的糖缀合物及其制备方法和在抗肿瘤疫苗中的应用

说明书

本发明提供了含STn或F‑STn的糖缀合物及其制备方法和在制备抗肿瘤疫苗中的应用，属于糖类缀合物技术领域。含STn或F‑STn的糖缀合物，所述糖缀合物包括STn或F‑STn和载体；所述STn或F‑STn通过连接键与载体偶联；所述连接键包括酰胺键、肟键或C‑N键；所述载体包括蛋白质、两性离子多糖、脂质或核酸。所述糖缀合物在制备抗肿瘤或癌症的疫苗或制备提高细胞和/或体液免疫应答的药物中的应用。F‑STn的糖蛋白缀合物制备的疫苗能够提高体液免疫和细胞免疫应答，且产生的抗体能够有效地识别STn阳性肿瘤细胞，并且通过ADCC及CDC途径裂解STn阳性肿瘤细胞。

技术领域

本发明属于糖类缀合物技术领域，具体涉及含STn或F-STn的糖缀合物及其制备方法和在抗肿瘤疫苗中的应用。

背景技术

近年来，基于糖抗原的抗肿瘤疫苗成为一个研究的热点(Keding,S.Carbohydratevaccines.Chem.Eng.News.2004,82,31-35.)。其中抗原STn是一个含有唾液酸的二糖结构，在人类肺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、乳腺癌、结直肠癌等多有表达，而在正常组织中表达极少(Holmberg,L.ExpertRev.Vaccines 2004,3,655-663.)，因而成为肿瘤免疫治疗的重要靶点。

Biomira公司将天然STn抗原与载体钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)结合构建用于预防结直肠癌和乳腺癌转移的疫苗STn-KLH然而，III期临床试验的结果表明，未能减少疾病进展时间并增加总生存率(Miles,D.Oncologist.2011,16,1092-1100)。当患者接受与激素联合治疗时，临床疗效不明显(Ibrahim,N.K.J.Cancer.2013,4,577-584)。其中一个可能的原因是STn免疫原性不足，不能在体内产生满意的免疫应答。

目前对于基于肿瘤相关糖抗原设计的抗肿瘤糖疫苗，主要通过以下策略提高疫苗的免疫应答，分别是：1)用佐剂来辅助，延长免疫反应时间及增强免疫应答水平(Bonam,S.R.Trends Pharmacol.Sci.2017,38,771-793)；2)通过与免疫原性载体结合诱导T细胞依赖的免疫反应(Astronomo,R.D.Nat.Rev.Drug Discovery.2010,9,308-324)；3)簇状抗原模拟肿瘤细胞表面的糖抗原结构，促进B细胞表面受体交联(Richichi,B.Angew.Chem.,Int.Ed.Engl.2014,53,11917-11920)。尽管在这一领域已经取得了进展，但迄今为止还没有一种以肿瘤相关糖抗原为基础的疫苗获得FDA的批准。因此，提高糖抗原的免疫原性仍有很大的需求。

改良肿瘤相关糖抗原结构以提高疫苗免疫原性的概念最早由Jennings于1986年提出(Jennings,H.J.J.Immunol 986,137,1708–1713)。影响这一策略的主要因素之一是结构修饰糖抗原的抗体与天然抗原的亲和力。研究发现对STn进行适当的结构修饰能够提高免疫原性，其中N-丙酰STn所产生的抗体是STn-KLH的两倍(Sahabuddin,S.Tetrahedron.2010,66,7510-7519)，N-丙酰triSTn疫苗诱导的抗triSTn的IgG抗体能有效识别表达STn簇的癌细胞(Chang,T.C.Angew.Chem.,Int.Ed.Engl.2018,57,8219-8224)。目前发现F-STn-KLH(两个乙酰基被氟乙酰基取代)与STn-KLH相比，可以有效抑制肿瘤的生长，显著延长荷瘤小鼠的生存时间。F-STn-KLH疫苗较强的抗肿瘤活性主要体现在细胞和体液免疫应答的增加(Song,C.Oncotarget.2017,8,47330-47343)。但是载体蛋白KLH是一种具有高糖基化的大型异质蛋白复合物，KLH蛋白的复杂性导致其制备的重复性差，限制了其临床应用。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种具有较高免疫活性的含STn或F-STn的糖缀合物及其制备方法和在抗肿瘤疫苗中的应用。