[发明专利]一种β链变异的血红蛋白糖化率的测定方法

权利要求书

1.一种非诊断目的的β链变异的糖化血红蛋白HbA1c糖化率的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

利用飞行时间质谱仪对若干含有正常血红蛋白的全血样本进行质谱检测，得到样品的αHb的质谱峰面积A(αHb)、αGHb的质谱峰面积A(αGHb)、βHb的质谱峰面积A(βHb)、βGHb的质谱峰面积A(βGHb)，计算每个样本的比例常数R2/R1的数值，其中R1＝A(αGHb)/(A(αHb)+A(αGHb))，R2＝A(βGHb)/(A(βHb)+A(βGHb))，求得所有样本的比例常数平均值C；

利用飞行时间质谱仪对若干血红蛋白溶液中糖化血红蛋白标准物质进行质谱检测，得到标准曲线Y＝[a*A(βGHb)/(A(βHb)+A(βGHb))+b]×100％，其中，Y为血红蛋白的糖化率；

利用飞行时间质谱仪对含有β链变异的待测血液样品进行质谱检测，得到样品的质谱图、αHb的质谱峰面积A(αHb)以及αGHb的质谱峰面积A(αGHb)；

对质谱图进行分析判断，

当βGHb蛋白峰没有受到β链变异体的影响时，则利用血红蛋白糖化率的计算公式Y＝[a*A(βGHb)/(A(βHb)+A(βGHb))+b]×100％，得出血红蛋白糖化率；

当βGHb蛋白峰受到β链变异体的影响时，则利用血红蛋白糖化率的计算公式Y＝[a*C*A(αGHb)/(A(αHb)+A(αGHb))+b]×100％，得出血红蛋白糖化率。

2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，利用飞行时间质谱仪对50例含有正常血红蛋白的全血样本进行质谱检测，求得所有样本的比例常数平均值C为1.62。

3.根据权利要求2所述的测定方法，其特征在于，利用飞行时间质谱仪对购于卫生部临床检验中心的标准品GBW09181a、GBW09182a和GBW09183a进行质谱检测，得到a＝0.0089，b＝–0.0126，标准曲线为Y＝[0.0089*A(βGHb)/(A(βHb)+A(βGHb))–0.0126]×100％。

4.根据权利要求3所述的测定方法，其特征在于，当βGHb蛋白峰受到β链变异体的影响时，含有β链变异的待测血液样品中血红蛋白糖化率的计算公式为Y＝[0.0144*A(αGHb)/(A(αHb)+A(αGHb))–0.0126]×100％。

5.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述质谱图的数据采集范围为5000～20000Da，采集频率为5000Hz。

6.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述飞行时间质谱仪是基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱MALDI-TOF-MS。

7.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，对待测血液样品进行质谱检测前，所述测定方法还包括待测血液样本处理步骤和靶板制备步骤。

8.根据权利要求7所述的测定方法，其特征在于，所述待测血液样本处理步骤包括：利用纯水稀释含有正常血红蛋白的全血样本，将稀释后的全血样本与SA基质按照1:10混合，得待测样本溶液。

9.根据权利要求7所述的测定方法，其特征在于，所述靶板制备步骤包括：将待测样本溶液滴加到飞行时间质谱仪的配套靶板上，40℃环境下静置使稀释后的全血样本与SA基质形成结晶。

10.根据权利要求8所述的测定方法，其特征在于，所述SA基质为芥子酸溶液，溶质为芥子酸，溶剂为0.1％三氟乙酸与乙腈的混合液。