[发明专利]一种用于水样中多种抗生素的检测方法

说明书

本发明公开了一种用于水样中多种抗生素的检测方法，该方法的检测步骤包括：水样经抽滤后取适量，加入Na₂EDTA并调节pH值，选用HLB小柱进行固相萃取，甲醇洗脱，洗脱液氮吹后复溶，采用高效液相色谱串联质谱法进样分析。本发明首次建立了同时对该多种抗生素定性及定量的检测方法，该方法的灵敏度高，检测结果准确，能满足地表水样中若干种目标抗生素在宽浓度范围内的准确定量测定，具有良好的实用性。

技术领域

本发明属于化合物检测技术领域，尤其涉及是一种抗生素的检测方法，该方法采用前处理、固相萃取及液质联用检测方法能实现水样中痕量抗生素的富集、准确定性及定量检测。

背景技术

抗生素也称为抗菌素，在低微浓度下能有选择地抑制或影响它种生物功能，主要用于治疗各种细菌感染或抑制致病微生物感染，其用量大，应用范围广。90％以上的抗生素用于医疗及农业，不可避免地给自然环境带来巨大压力：人类和动物使用的抗生素约80％会以原药、代谢产物等形式排出体外，由于污水截流不彻底等原因，其通过生活污水排放、养殖废水排放、农业粪肥灌溉径流等不同途径进入环境水体，残留的抗生素进入环境水体后，会给环境水体中的微生物带来巨大的选择性压力，对生态系统中各类生物产生危害，还可能在环境和生物体中累积或者通过食物链富集，诱发和传播各类抗生素耐药菌及抗生素抗性基因，严重威胁人类健康。

近年来，在国外的不同环境水体中均检测到抗生素残留，国内的抗生素污染情况也不乐观，多地地表水中检出抗生素：如在长三角地区城市生活污水，养猪场和甲鱼养殖场废水等样品中分别检出了磺胺类、四环素类、氯霉素类等多种抗生素污染；我国北方典型市政污水存在四环素类抗生素污染，环渤海地区检出14种磺胺类抗生素；我国的海河、长江入海口、黄浦江、珠江、辽河等河流的部分点位中均检出抗生素，部分地表水取样检测抗生素含量惊人，其中珠江广州段的污染尤为严重。但目前，我国关于抗生素污染监管力度较为薄弱，尚未开展水环境中抗生素污染状况的系统调查工作，尚无水中抗生素检测的法定标准。

因此，亟需一种应用于抗生素的污染情况的系统调查的检测方法，为抗生素检测标准方法的制定研究提供参考，来解决上述问题。

在发明专利申请号为CN201310247043.5的专利申请中，公开了一种水中痕量四环素类抗生素的检测方法，其步骤包括：水样过滤除去悬浮物，调节水样pH为2-4；依次利用丙酮、甲醇、含乙酸铵的甲酸水溶液、超纯水活化HLB固相萃取柱，取步骤1中的水样过柱，将HLB固相萃取柱在氮气保护下干燥，再用洗脱液洗脱HLB固相萃取柱，收集洗脱液在氮气流下吹干，加入乙腈溶解残留物；定量检测痕量四环素类抗生素的浓度。但是，上述发明专利公开的水中痕量四环素类抗生素的检测方法，只能检测固定范围的四环素类抗生素，无法解决复杂性水质中多种抗生素检测。

发明内容

为解决上述问题，本发明的首要目的在于针对水样中微量乃至痕量的抗生素污染物，提供一种用于水样中多种抗生素的检测方法，其检测结果专属、灵敏、准确，可用于地表水中18种抗生素的定性及定量检测分析。

发明的另一个目的在于提供一种用于水样中多种抗生素的检测方法，该方法可应用于抗生素的污染情况的系统调查，为抗生素检测标准方法的制定研究提供参考。

为实现上述目的，本发明的技术方案如下：

一种用于水样中多种抗生素的检测方法，其特征在于该方法包括以下步骤：

101、水样的前处理：使用微孔滤膜对水样进行过滤，取过滤后水样，向过滤后水样中加入Na₂EDTA并使其溶解，再用稀酸调节pH值至2.5-3.5，得到前处理水样；

102、水样中抗生素的富集：将前处理的水样经自动固相萃取仪进行萃取，并选用经活化的HLB小柱进行痕量抗生素富集，后以甲醇洗脱，收集洗脱液，氮吹至干后复溶，滤过，作为待测液；