[发明专利]用于肿瘤免疫治疗的具有双Her2位点的双特异性抗体

权利要求书

1.一种具有双Her2位点的双特异性抗体，其包含：

(a)抗CD3的抗原结合片段Fab，其具有轻链可变区VL和轻链恒定区CL，以及重链可变区VH和重链恒定区CH1；

(b)抗Her2单域抗原结合片段VHH1，其被连接至所述Fab的CL的C端，并且能够结合至第一Her2表位；以及

(c)抗Her2单域抗原结合片段VHH2，其被连接至所述Fab的CH1的C端，并且能够结合至第二Her2表位；

其中，所述第一Her2表位和所述第二Her2表位是Her2的非重叠性表位，并且所述VHH1和VHH2中的一个的氨基酸序列包含SEQ ID NO.2的序列，

所述VHH1和VHH2中的另一个的氨基酸序列包含SEQ ID NO.1的序列。

2.根据权利要求1所述的具有双Her2位点的双特异性抗体，其中所述VHH1和/或VHH2通过接头(GGGGS)₃连接至所述Fab。

3.根据权利要求1所述的具有双Her2位点的双特异性抗体，其中所述VHH1和VHH2中的一个的氨基酸序列为SEQ ID NO.2的序列。

4.根据权利要求1所述的具有双Her2位点的双特异性抗体，其中所述VHH1和VHH2中的一个的氨基酸序列为SEQ ID NO.2的序列，所述VHH1和VHH2中的另一个的氨基酸序列为SEQID NO.1的序列。

5.根据权利要求1所述的具有双Her2位点的双特异性抗体，其中所述抗CD3的抗原结合片段Fab是来自CD3单克隆抗体UCHT1的抗原结合片段。

6.根据权利要求1所述的具有双Her2位点的双特异性抗体，其中所述具有双Her2位点的双特异性抗体的分子量为60-100kDa。

7.根据权利要求1所述的具有双Her2位点的双特异性抗体，其中所述具有双Her2位点的双特异性抗体的分子量为79kDa。

8.一种具有双Her2位点的双特异性抗体，包含：

第一多肽链，其包含抗CD3的Fab的轻链恒定区CL、抗CD3的Fab的轻链可变区VL以及抗Her2单域抗原结合片段VHH1，其中所述VL、CL、VHH1按从N端至C端顺次连接，以及

第二多肽链，其包含抗CD3的Fab的重链恒定区CH1、抗CD3的Fab的重链可变区VH以及抗Her2单域抗原结合片段VHH2，其中所述VH、CH1、VHH2按从N端至C端顺次连接；

所述第一多肽链与所述第二多肽链通过二硫键连接；

其中，所述第二多肽链的氨基酸序列包含SEQ ID NO.5所示的序列，所述第一多肽链的氨基酸序列包含SEQ ID NO.3所示的序列。

9.一种用于肿瘤免疫治疗的药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的权利要求1-8的任一项所述的具有双Her2位点的双特异性抗体以及药学上可接受的载体。

10.权利要求1或8所述的具有双Her2位点的双特异性抗体在制备治疗Her2阳性肿瘤的药物中的应用。

11.根据权利要求10所述的应用，其中所述Her2阳性肿瘤为通过免疫组化确定的IHC评分为1+、2+或3+Her2阳性肿瘤。

12.根据权利要求11所述的应用，其中所述Her2阳性肿瘤选自食管癌、胃癌、结肠癌、直肠癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、子宫颈癌、子宫体癌、卵巢癌、膀胱癌、头颈癌、子宫内膜癌、骨肉瘤、前列腺癌、神经母细胞瘤。

13.根据权利要求12所述的应用，其中所述肿瘤为曲妥珠单抗耐药或无应答肿瘤。

14.一种编码权利要求8中所述的第一多肽链或第二多肽链的多核苷酸。