[发明专利]用于肿瘤免疫治疗的具有双Her2位点的双特异性抗体

说明书

本发明公开了一种具有双Her2位点的双特异性抗体，其包含：（a）抗CD3的抗原结合片段Fab，其具有轻链可变区VL和轻链恒定区CL，以及重链可变区VH和重链恒定区CH1；（b）抗Her2单域抗原结合片段VHH1，其被连接至所述Fab的CL的C端，并且能够结合至第一Her2表位；以及（c）抗Her2单域抗原结合片段VHH2，其被连接至所述Fab的CH1的C端，并且能够结合至第二Her2表位；其中，所述第一Her2表位和所述第二Her2表位是Her2的非重叠性表位。本发明的具有双Her2位点的双特异性抗体对于IHC评分为+1的Her2肿瘤也具有作用，或能够作用于曲妥珠单抗抗性肿瘤。

技术领域

本发明涉及一种用于肿瘤免疫治疗的双特异性抗体，特别是一种具有双Her2位点的双特异性抗体。本发明还涉及包含该双特异性抗体的药物组合物以及编码所述抗体片段的多核苷酸，包含该多核苷酸的表达载体，包含该表达载体的宿主细胞。

背景技术

人表皮生长因子受体2(Her2，也称为Her2/neu或ErbB2)是跨膜受体酪氨酸激酶的Her家族的一员。Her2包含细胞质酪氨酸激酶区、单一跨膜区以及约630个氨基酸的胞外区，该胞外区含有四种不同结构域(结构域I-IV)。Her2原癌基因在25％–30％的人类原发性乳腺肿瘤和各种其他人类癌症(例如，肺癌、胃癌、口腔癌和结直肠癌)中过表达且具有功能重要性。

Her2在乳腺癌发展中的重要作用促进针对Her2的治疗发展。抗Her2疗法、曲妥珠单抗(Trastuzumab)、拉帕替尼(Lapatinib)、帕妥珠单抗(Pertuzumab)和T-DM1的研发已经为Her2阳性患者带来了临床益处。目前曲妥珠单抗仍然是Her2阳性乳腺癌的主要治疗手段。然而，当前的疗法仍然存在低反应率和耐药性的问题。例如，由于原发耐药性和获得耐药性，仅有15％-30％的Her2阳性患者对曲妥珠单抗治疗有反应。曲妥珠单抗对体内和体外Her2低或中等表达癌细胞的影响极小。差的内化作用也将在T-DM1治疗移性乳腺癌中导致耐药性。为了改善针对Her-2的抗体的效力，日益增多新型的靶向Her2的抗体现在已经被报道，其中包括组合疗法和双特异性抗体，例如曲妥珠单抗、帕妥珠单抗与多烯紫杉醇的联用已经被批准用于Her2阳性转移性乳腺癌的患者的一线治疗；以及靶向Her2和Her3、或靶向Her2的两个不同表位、或通过靶向Her2和CD3将T细胞接合至Her2癌细胞的的双特异性抗体等。但这些抗体和疗法对于Her2低表达细胞(例如，MCF7细胞，IHC评分为1+)仍然没有细胞毒性或仅具有低细胞毒性。

发明内容

本发明要解决的技术问题在于向对Her2靶向治疗耐药或无应答的患者提供治疗方案。本发明要解决的另一技术问题在于提供一种具有更广泛适应性的治疗方案，其对于任何级别的Her2过表达肿瘤(即，IHC评分为3+、2+、1+的Her2肿瘤)均有效。

本发明在一方面提供一种具有双Her2位点的双特异性抗体(在本文中也称为Bp-Bs)，其包含：(a)抗CD3的抗原结合片段Fab，其具有轻链可变区VL和轻链恒定区CL，以及重链可变区VH和重链恒定区CH1；(b)抗Her2单域抗原结合片段VHH1，其被连接至所述Fab的CL的C端，并且能够结合至第一Her2表位；以及(c)抗Her2单域抗原结合片段VHH2，其被连接至所述Fab的CH1的C端，并且能够结合至第二Her2表位；其中，所述第一Her2表位和所述第二Her2表位是Her2的非重叠性表位。