[发明专利]一种基于点击化学的三维DNA微阵列表面的制备方法在审
申请号: | 201910369563.0 | 申请日: | 2019-05-06 |
公开(公告)号: | CN110055318A | 公开(公告)日: | 2019-07-26 |
发明(设计)人: | 向国兵;张明航;吕华;施琦 | 申请(专利权)人: | 南京拓远生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6869 | 分类号: | C12Q1/6869;C40B50/06 |
代理公司: | 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人: | 肖丽 |
地址: | 210000 江苏省南京市浦口区江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 微阵列 反应基团 三维 反应性高分子 制备 共价固定 点击化学法 反应性功能 点击化学 图案化 方式形成图案 三维表面结构 流动池表面 固体表面 三维表面 构建 裂解 | ||
1.一种基于点击化学的三维DNA微阵列表面的制备方法,其特征在于,包括:
在固体表面上,利用图案化裂解方式,形成图案化反应基团微阵列;
对反应基团于所述图案化反应基团微阵列上进行固定,得到反应基团微阵列;
将反应性功能高分子于所述反应基团微阵列上共价固定,形成三维反应性高分子微阵列;
对带反应基团的DNA引物于所述三维反应性高分子微阵列上进行共价固定,形成三维DNA引物微阵列表面;
其中,共价固定反应性功能高分子和共价固定带反应基团的DNA引物的方法中,至少一种采用点击化学法固定。
2.如权利要求1所述基于点击化学的三维DNA微阵列表面的制备方法,其特征在于,所述“在固体表面上,利用图案化裂解方式,形成图案化反应基团微阵列”包括:
利用3-氨基丙基三甲氧基硅烷,于所述固体表面上形成NH2基团,得到具NH2基团表面;
在所述具NH2基团表面上共价固定可光裂解反应化合物,构建包含反应后生成的可光裂解小分子官能团的可光裂解基团表面;
对所述可光裂解基团表面进行图案化光解,形成所述图案化基团微阵列。
3.如权利要求1所述基于点击化学的三维DNA微阵列表面的制备方法,其特征在于,所述“对反应基团于所述图案化反应基团微阵列上进行固定,得到反应基团微阵列”包括:
取含有反应基团的化合物置于作为反应试剂的无水二甲基甲酰胺中;
加入三乙胺,得到第一混合溶液;
将所述第一混合溶液加入所述图案化基团微阵列中,静置、冲洗并干燥后,得到所述反应基团微阵列。
4.如权利要求3所述基于点击化学的三维DNA微阵列表面的制备方法,其特征在于,
所述反应基团为N3基团和/或炔烃基团;
所述含有反应基团的化合物为包含有N3基团的叠氮基团化合物和/或包含有炔烃基团的炔烃基团化合物。
5.如权利要求4所述基于点击化学的三维DNA微阵列表面的制备方法,其特征在于,
所述功能高分子为带炔烃基团的高分子化合物或带叠氮基团的高分子化合物;并且,
在所述含有反应基团的化合物为所述叠氮基团化合物时,所述功能高分子为对应的所述带炔烃基团的高分子化合物;
在所述含有反应基团的化合物为所述炔烃基团化合物时,所述功能高分子为对应的所述带叠氮基团的高分子化合物。
6.如权利要求5所述基于点击化学的三维DNA微阵列表面的制备方法,其特征在于,
在所述含有反应基团的化合物为所述叠氮基团化合物时,得到的所述反应基团微阵列为N3反应基团微阵列;
所述“将反应性功能高分子于所述反应基团微阵列上共价固定,形成三维反应性高分子微阵列”包括:
室温下,取所述带炔烃基团的高分子化合物、无水硫酸铜、抗坏血酸钠、氯化钠溶解于水中,得到第二混合溶液;
将所述第二混合溶液点样于所述N3反应基团微阵列中,静置、冲洗后,得到所述三维反应性高分子微阵列表面。
7.如权利要求5所述基于点击化学的三维DNA微阵列表面的制备方法,其特征在于,
在所述含有反应基团的化合物为所述炔烃基团化合物时,得到的所述反应基团微阵列为炔烃反应基团微阵列;
所述“将反应性功能高分子于所述反应基团微阵列上共价固定,形成三维反应性高分子微阵列”包括:
室温下,取所述带叠氮基团的高分子化合物、无水硫酸铜、抗坏血酸钠、氯化钠溶解于水中,得到第三混合溶液;
将所述第三混合溶液点样于所述炔烃反应基团微阵列中,静置、冲洗后,得到所述三维高分子微阵列表面。
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