[发明专利]一种与硼砂特异性结合的核酸适配体

说明书

本发明属于生物医学技术领域，尤其涉及一种与硼砂特异性结合的核酸适配体，与硼砂特异性结合的核酸适配体核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；该核酸适配体为单链DNA，由82个核苷酸组成，拓扑学结构为直链状；预测的二级结构具有突出的环和茎，吉布斯自由能DG＝‑15.21。本发明利用SELEX技术筛选出的核酸适配体Bor‑A01能够高亲和力高特异性的识别并结合硼砂；核酸适配体Bor‑A01的鉴别对于食品中残留的硼砂的检测，进而降低硼砂对人体的侵害具有重要意义。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，尤其涉及一种与硼砂特异性结合的核酸适配体。

背景技术

目前，最接近的现有技术：

核酸适配体是经过指数富集配体系统进化技术(SyStematic evolution ofligandS by exponential enrichment，SELEX)筛选得到的能与金属离子、小分子、生物大分子，甚至整个细胞高专一性和亲和性结合的SSDNA或RNA分子。核酸适配体不仅具备抗体分子的识别特性，凡是涉及抗体的诊断领域，几乎都可以用核酸适配体来代替，而且还具备自己独特的优异性能，其具有靶分子范围广、分子质量小、免疫原性低、易于化学合成、改造和标记等优点。核酸适配体及其相关筛选技术(SELEX)，核酸适配体近年来在治疗新药、药物运输、癌细胞检测、生物成像、生物标志物的发现、毒品检测、抗病毒等生物医学领域中的应用。

硼砂，一般写作Na₂B₄O₇·10H₂O，是非常重要的含硼矿物及硼化合物，通常为无色晶体的白色粉末，易溶于水。硼砂可用作清洁剂、化妆品、杀虫剂，也可用于配置缓冲溶液和制取其他硼化合物等。硼砂的毒性较高，是一种强致癌物质，对人体的胃、肾脏、肝脏、脑和皮肤损害极大，硼砂的成人中毒剂量为1-3克，成人致死量为15克，婴儿致死量为2-3克。人体若摄入过多的硼砂，会引发多脏器的蓄积性中毒。长期过量摄入硼砂，对人体生殖、发育和内分泌系统有毒性影响。短时间摄入大剂量硼砂，可能导致急性中毒，轻者引起头晕、头痛、食欲不振、消化不良、体重减轻等症状；严重者出现呕吐、腹泻、休克、昏迷等中毒表现。硼砂中毒者的病理检查可见胃、肾脏、肝脏、脑和皮肤出现非特异性病变，主要有肝脏充血、脂肪变性、肝细胞混浊肿胀；肾呈弥漫性水肿，肾小球和肾小管均有损害；脑和肺出现水肿。不法生产者和商贩为了增加食品的韧性、脆度口感，或延长保存期限，往往会在食品的加工过程中违法添加硼砂。由于硼砂的强致癌性和较强毒性，世界各国普遍禁止将硼砂添加于食品中，我国《食品卫生法》和《食品添加剂卫生管理办法》中明令禁止将硼砂作为食品添加剂使用。

目前针对食品中检测硼砂主要方法为姜黄比色法。该法需要先在酸性条件下将硼砂转变为硼酸，通过检测硼酸的含量来间接推算出硼砂的添加量。由于前期的酸化操作，这种检测方法的结果具有一定的偏差，且检测结果只能表示食品中存有硼酸，并不一定是直接添加了硼砂。因此为保证广大人民群众的身体健康，建立一种准确可靠、灵敏快速、广泛适用的检测食品中硼砂的方法显得尤为重要。

综上所述，现有技术存在的问题是：

目前针对食品中检测硼砂姜黄比色法，结果具有一定的偏差，且检测结果只能表示食品中存有硼酸，并不一定是直接添加了硼砂。对检测食品中硼砂不能提供依据。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种与硼砂特异性结合的核酸适配体。

本发明是这样实现的，一种与硼砂特异性结合的核酸适配体，所述与硼砂特异性结合的核酸适配体核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；该核酸适配体为单链DNA，由82个核苷酸组成，拓扑学结构为直链状。

进一步，预测的二级结构具有突出的环和茎，吉布斯自由能DG＝-15.21。