[发明专利]一种监测miRNA动态变化的报告基因及其制备方法有效
| 申请号： | 201910372849.4 | 申请日： | 2019-05-06 |
| 公开（公告）号： | CN110144395B | 公开（公告）日： | 2020-12-11 |
| 发明（设计）人： | 王福;施潇蕊;王希楠;郑海锋;陈思;解锦荣;毛文杰;郭镔 | 申请（专利权）人： | 西安电子科技大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6883 | 分类号： | C12Q1/6883;C12N15/113 |
| 代理公司： | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人： | 马超前 |
| 地址： | 710126 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 监测 mirna 动态 变化 报告 基因 及其 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种监测miRNA动态变化的报告基因，其特征在于，包括质粒psiCHECK-2-HM471G、PUF基因和Fluc基因，还包括位于PUF基因终止密码子TGA下游与目的miRNA完全互补配对的四段串联重复序列，和位于Fluc基因起始密码子ATG上游与PUF完全互补配对的六段NRE串联重复序列；
所述的报告基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.权利要求1所述的报告基因在检测神经分化miR-124a动态变化中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，当细胞中不存在目的miR-124a时，PUF会结合到6xNRE序列上，从而抑制Fluc的表达，细胞中荧光素酶含量低；当细胞中存在目的miR-124a时，目的miR-124a会结合到4x miR靶序列上，抑制PUF的表达，从而解除对Fluc的抑制，使Fluc表达，产生可以检测的荧光信号。
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