[发明专利]抗肿瘤NK细胞的制备方法及其细胞与应用在审
| 申请号： | 201910376948.X | 申请日： | 2019-05-07 |
| 公开（公告）号： | CN110106202A | 公开（公告）日： | 2019-08-09 |
| 发明（设计）人： | 黄常新;杨丽丽;李永强;王聪洁;张嗣玉;高岚岚;葛钻敏;苏萌 | 申请（专利权）人： | 杭州师范大学 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N5/10;A61K35/17;A61P35/00 |
| 代理公司： | 北京东方盛凡知识产权代理事务所(普通合伙) 11562 | 代理人： | 宋平 |
| 地址： | 311121 浙江省杭*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 转基因 基因工程载体 制备 趋化因子受体基因 慢病毒载体 细胞 抑制肿瘤 抗肿瘤 转染 基因 生长 应用 | ||
1.一种转基因NK细胞的制备方法，所述制备方法为：
将趋化因子受体基因转到NK细胞中，得到能够过表达所述趋化因子受体基因的所述转基因NK细胞。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：
所述趋化因子受体基因是NK细胞的趋化因子受体基因；
优选，所述趋化因子受体基因为：人CCR7基因和/或人CXCR4基因；
优选，所述人CCR7基因的GenBank号为：NM_001301714.1；所述人CXCR4基因的GenBank号为：NM_001008540.2；
优选，所述NK细胞是异体NK细胞；
优选，所述NK细胞是NK92细胞；
优选，所述趋化因子受体基因在所述抗肿瘤NK细胞中稳定过表达。
3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
(a)将所述趋化因子受体基因连接到基因工程载体上，形成重组基因工程载体；
(b)将所述重组基因工程载体转化或转染所述NK细胞，得到所述转基因NK细胞；
优选，所述基因工程载体是慢病毒载体，更优选，所述基因工程载体是慢病毒载体PHS-BVC-LW238。
4.一种转基因NK细胞，所述转基因NK细胞是如权利要求1-3中任一项所述的制备方法制备得到的所述转基因NK细胞。
5.一种转基因NK细胞，所述转基因NK细胞能够表达趋化因子受体基因；
优选，所述趋化因子受体基因是NK细胞的趋化因子受体基因；
优选，所述趋化因子受体基因为：人CCR7基因和/或人CXCR4基因；
优选，所述CCR7基因的GenBank号为：NM_001301714.1；所述CXCR4基因的GenBank号为：NM_001008540.2。
6.一种重组基因工程表达载体，所述重组基因工程表达载体中重组有趋化因子受体基因，所述基因工程表达载体能够用于转化或转染NK细胞；
优选，所述趋化因子受体基因是NK细胞的趋化因子受体基因；
优选，所述NK细胞的趋化因子受体基因是人CCR7基因和/或人CXCR4基因；
优选，所述人CCR7基因的GenBank号为：NM_001301714.1；所述CXCR4基因的GenBank号为：NM_001008540.2；
优选，所述重组基因工程表达载体来自慢病毒载体，更优选，所述重组基因工程表达载体来自PHS-BVC-LW238。
7.一种试剂盒，所述试剂盒中含有如权利要求4或5所述的转基因NK细胞或如权利要求6所述的重组基因工程表达载体。
8.如权利要求1-3中任一项所述的制备方法在制备抗肿瘤制剂或肿瘤趋化制剂中的用途。
9.如权利要求4或5所述的转基因NK细胞或如权利要求6所述的重组基因工程表达载体或如权利要求7所述的试剂盒在杀伤肿瘤细胞或肿瘤趋化中的用途。
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