[发明专利]一株产聚唾液酸的大肠杆菌及其应用在审
| 申请号： | 201910382328.7 | 申请日： | 2019-05-07 |
| 公开（公告）号： | CN110093293A | 公开（公告）日： | 2019-08-06 |
| 发明（设计）人： | 郭亭;施明雨;马祥敏;陈勇;应汉杰 | 申请（专利权）人： | 江苏集萃工业生物技术研究所有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N13/00;C12P19/26;C12R1/19 |
| 代理公司： | 江苏圣典律师事务所 32237 | 代理人： | 黄振华 |
| 地址： | 210000 江苏省南京市江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 聚唾液酸 保藏 大肠杆菌 发酵工艺 陶瓷膜 菌体 菌株 截留 生物工程技术领域 中国典型培养物 产物分离 产物抑制 发酵过程 发酵技术 高效制备 离心回收 连续发酵 络合剂 通透剂 唾液酸 混匀 发酵 高产 筛选 分类 应用 | ||
1.一株产聚唾液酸的大肠杆菌，其分类命名为大肠杆菌，菌株号K235-GX124，已保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO：M2018878，保藏日期为2018年12月10日。
2.权利要求1所述产聚唾液酸的大肠杆菌在制备聚唾液酸中的应用。
3.权利要求1所述产聚唾液酸的大肠杆菌在制备唾液酸中的应用。
4.根据权利要求2或3所述的应用，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将大肠杆菌K235-GX124接种至发酵培养基中，利用氨水调节pH为6.3～6.5，发酵培养；
(2)以10～30mL/h/L速率进行补料发酵；
(3)离心发酵液，上清液利用陶瓷膜进行过滤，收集上清液中的聚唾液酸；
(4)步骤(3)离心得到的菌体和过滤得到的滤液回流至发酵罐，继续进行发酵；
(5)每12～20h对发酵液进行陶瓷膜过滤分离，连续发酵5～15批次。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，步骤(1)中，所述的发酵培养基包括如下组分：
山梨醇10～30g/L、酵母粉5～20g/L、MgSO4 0.1～1g/L、K2HPO4 1～3g/L、KH2PO41～3g/L，溶剂为水。
6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，步骤(1)中，所述的发酵培养，其培养条件如下：
转速200～800rpm，通风量2～10L/min，发酵温度33～40℃，培养时间为5～8h。
7.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，步骤(2)中，所述的补料发酵，其补料培养基为山梨醇250～350g/L。
8.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，步骤(2)中，所述的补料发酵，其发酵条件为：利用氨水调节pH为6.3-6.5，以10～30mL/h/L速率进行补料发酵，继续发酵12～20h。
9.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，步骤(3)中，所述的陶瓷膜为50-300nm孔径的陶瓷膜。
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