[发明专利]一种基于聚集诱导的电化学发光特异检测RNA和DNA的方法有效
| 申请号： | 201910382867.0 | 申请日： | 2019-05-09 |
| 公开（公告）号： | CN110082404B | 公开（公告）日： | 2021-06-04 |
| 发明（设计）人： | 鲁理平;张霖琳 | 申请（专利权）人： | 北京工业大学 |
| 主分类号： | G01N27/26 | 分类号： | G01N27/26 |
| 代理公司： | 北京思海天达知识产权代理有限公司 11203 | 代理人： | 刘萍 |
| 地址： | 100124 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 聚集 诱导 电化学 发光 特异 检测 rna dna 方法 | ||
1.一种基于聚集诱导的电化学发光特异检测RNA和DNA的方法，包括以下步骤：
1)使用水合三氯化钌、邻菲罗啉和氯化锂合成cis-[Ru(phen)2Cl2]·3H2O复合物；
确定ssDNA、dsDNA和RNA序列；
ssDNA-1：5’AGTTGCTTAGTCTAGTAAGCATTAGGAC3’
ssDNA-2：5’GTCCTAATGCTTACTAGACTAAGCAACT3’
RNA：5’AGUUGCUUAGUCUAGUAAGCAUUAGGAC3’
dsDNA：5’AGTTGCTTAGTCTAGTAAGCATTAGGAC
GTCCTAATGCTTACTAGACTAAGCAACT3’
2)玻碳电极的准备：打磨玻碳电极，超声清洗；
3)将制备好的[Ru(phen)2Cl2]·3H2O复合物溶于乙腈中，得到100-50μM的cis-[Ru(phen)2Cl2]·3H2O乙腈溶液，向内加入二次水，二次水的质量是乙腈的质量的10～90％，使其聚集；
4)加入ssDNA、dsDNA和RNA，在氮气范围下检测其电化学发光强度，并确定cis-[Ru(phen)2Cl2]·3H2O复合物对RNA和DNA的筛选。
2.按照权利要求1的方法，其特征在于，确定ssDNA碱基序列，dsDNA碱基序列与ssDNA碱基完全互补，RNA碱基序列为ssDNA中T碱基换为U碱基。
3.按照权利要求1的方法，其特征在于，ssDNA、dsDNA溶于PBS缓冲液中，浓度为5mM，pH＝7.4。
4.按照权利要求1的方法，其特征在于，所用玻碳电极的直径是3mm，打磨玻碳电极是用0.05μm Al2O3粉末。
5.按照权利要求1的方法，其特征在于，所用ssDNA、dsDNA和RNA的浓度是2μM。
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