[发明专利]快速检测裂褶菌液体菌种是否达标的方法及其验证方法

权利要求书

1.快速检测裂褶菌液体菌种是否达标的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)制备液体培养基：培养基包括有如下成分：麸皮2％、葡萄糖1.5％、蛋白胨0.2％、KH₂PO₄ 0.2％、MgSO₄ 0.15％；

(2)液体菌种扩大培养，将测裂褶菌液体菌种种子液投放到盛放了培养基的发酵罐内，投放量为罐内培养基质量的2-4％，罐内压力维持在0.04-0.05Mpa，保持温度24℃，培养2-4d，得到发酵液；

(3)检测发酵液pH值：先用无菌瓶取罐内液体20-30ml，摇晃洗瓶，倒掉，再次取50ml备用，使用pH计校准后测量，pH值维持5min不变后读数，当pH值达到5.4±0.1时，裂褶菌液体菌种即达到使用标准。

2.验证如权利要求1所述方法的方法，其特征在于，方法如下：

(1)测量菌丝干重：将发酵罐中的剩余的发酵液用两层纱布过滤，并用清水清洗2-3遍，不滴水后将过滤出的菌丝放入已知重量的培养皿中，90℃烘干至恒重，称重；

(2)测量菌丝活力：无菌条件下用移液枪吸取1ml菌种加入9ml无菌水中，混匀，吸取1ml于平板上，在26℃恒温培养箱中培养24h后计菌落萌发数；

(3)测量菌球直径：用牙签挑取具有代表性的15个菌球于滤纸上，待吸水完成呈现出菌球形态后用游标卡尺测量，并计算菌球平均直径；

(4)确定发酵终点pH值与菌丝干重、菌丝球活力之间的关系，其关系如下：随着pH值增大，菌丝干重呈现出先增加后下降趋势，起始pH值在5.5-6.0之间时，在干重最大、菌丝球活力最旺盛时，发酵液的终点pH值均维持在5.4±0.1之间。