[发明专利]植物乳杆菌发酵产高活性抗菌肽的方法

说明书

本发明公开了一种植物乳杆菌CGMCC5297发酵产高活性抗菌肽的发酵条件，优化发酵培养基配方为葡萄糖10‑60g/L，胰酪胨8‑12g/L，酵母粉3‑7.5g/L，发酵罐优化发酵条件为通气比4.7‑6.4vvm，转速100‑150r/min，接种量1.5‑3.5％。培养基的pH为5.8‑6.2。该种方法优化了培养基中碳源和氮源的质量比，同时控制无机盐及表面活性剂的添加量，大大提高了抗菌肽的产量，获得的抗菌肽效价是未优化前的1.4倍，显示了良好的产业化生产潜力。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及植物乳杆菌发酵制备高活性抗菌肽的方法。

背景技术

食品安全问题是世界范围内的重要课题，在我国这样的发展中国家问题尤为突出，近年来食源性疾病患者的数目一直居高不下，由微生物引起的食物中毒情况非常严重。添加化学防腐剂是人类使用的重要食品保藏方法，但经长期研究发现过量食用合成的防腐剂对血压，心脏，肾脏等有不良影响，甚至有些化学防腐剂有致癌性，致畸性和易引起食物中毒等问题。热杀菌也是食品加过程中杀灭微生物的重要方法，但对某些低温制品，加热温度过高，其色泽，风味会发生明显变化，营养价值也大幅降低。其它物理方法：如紫外消毒，过滤除菌，钴60照射法等，对人体无毒害作用，但当包装打开后，又有再次感染腐败菌的可能。因此，开发出高效，稳定，安全的天然食品防腐剂市食品工业发展的必然趋势。

单核细胞增生李斯特菌是致病微生物，是人类和动物的严重疾病根源，尤其易于通过污染食品进行传播，更具体的说是通过肉类，肉质品，海产品，奶类及由其衍生的产品。单增李斯特氏菌广泛存在于自然界中，不易被冻融，能耐受较高的渗透压，在土壤、地表水、污水、废水、植物、青储饲料、烂菜中均有该菌存在，所以动物很容易食入该菌，并通过口腔-粪便的途径进行传播。据报道，健康人粪便中单增李氏菌的携带率为0.6-16％,有70％的人可短期带菌， 4-8％的水产品、5-10％的奶及其产品、30％以上的肉制品及15％以上的家禽均被该菌污染。人主要通过食入软奶酪、未充分加热的鸡肉、未再次加热的热狗、鲜牛奶、巴氏消毒奶、冰激凌、生牛排、羊排、卷心菜色拉、芹菜、西红柿、法式馅饼、冻猪舌等而感染，约占85-90％的病例是由被污染的食品引起的。

植物乳杆菌CGMCC5297所产抗菌肽对单核细胞增多性李斯特菌具有极强的抑制作用。现阶段该植物乳杆菌抗菌肽的研发仍然处于实验室阶段，对于菌体培养的主要培养基为MRS。考虑到中试实验和后期大规模生产的效益问题，有必要选择一种高密度发酵的培养基，进行工业化生产。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明提供一种植物乳杆菌 CGMCC5297生产高活性抗菌肽的发酵培养基及发酵条件，克服现有技术中植物乳杆菌CGMCC5297抗菌肽没有实现工业化生产的问题。

本发明的技术方案是：

一种植物乳杆菌CGMCC5297生产高活性抗菌肽的发酵培养基，所述发酵培养基成分为葡萄糖10-60g/L，胰酪胨8-12g/L，酵母粉3-7.5g/L。

优选的培养基成分为葡萄糖55.34g/L,胰酪胨10.85g/L,酵母粉5.09g/L。

一种植物乳杆菌CGMCC5297生产高活性抗菌肽的发酵条件，其中通气比通气比4.7-6.4vvm，转速100-150r/min，接种量1.5-3.5％。

优选的发酵条件为通气比5.5vvm，转速120r/min，接种量2％。

本发明的有益效果是：该种方法优化了培养基中碳源和氮源的质量比，同时控制无机盐及表面活性剂的添加量，大大提高了抗菌肽的产量，获得的抗菌肽效价是未优化前的1.4倍，显示了良好的产业化生产潜力。

附图说明

图1抗菌肽效价测定的标准曲线

具体实施方式