[发明专利]利用碳量子点检测溶液中葡萄糖浓度的方法在审
申请号: | 201910385754.6 | 申请日: | 2019-05-09 |
公开(公告)号: | CN110095444A | 公开(公告)日: | 2019-08-06 |
发明(设计)人: | 黄珊;肖琦;姚建东;刘义 | 申请(专利权)人: | 南宁师范大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11369 | 代理人: | 靳浩 |
地址: | 530023 广西壮族*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 葡萄糖 葡萄糖标准溶液 量子点检测 葡萄糖标准 标准曲线 待测样品 等量 葡萄糖氧化酶溶液 辣根过氧化物酶 荧光分光光度计 邻苯二胺溶液 量子点溶液 待测溶液 混合反应 灵敏度 检测 荧光 混匀 制备 灵敏 绘制 | ||
1.利用碳量子点检测溶液中葡萄糖浓度的方法,其特征在于,包括如下步骤:
A、制备不同浓度的葡萄糖标准溶液;
B、分别向所述不同浓度的葡萄糖标准溶液中添加等量的葡萄糖氧化酶溶液、邻苯二胺溶液和辣根过氧化物酶溶液,于37℃混合反应后,再分别加入等量的碳量子点溶液,常温混匀后,得不同浓度的葡萄糖标准待测样品;
C、将所述不同浓度的葡萄糖标准待测样品依次置于荧光分光光度计中,检测其在442nm和573nm处的荧光强度,以葡萄糖浓度为横坐标,I573/I442为纵坐标,绘制标准曲线;
D、配制葡萄糖待测溶液,根据步骤B、步骤C和标准曲线,获得所述葡萄糖待测溶液中的葡萄糖浓度。
2.如权利要求1所述的利用碳量子点检测溶液中葡萄糖浓度的方法,其特征在于,所述不同浓度的葡萄糖标准溶液的配制方法为:a、用葡萄糖干粉配制浓度为1×10-2mol/L的葡萄糖原液;b、将所述原液用pH为7.4、浓度为0.05mol/L的Tris-HCl缓冲液进行梯度稀释,即得;所述不同浓度的葡萄糖标准溶液的浓度依次为0mol/L、1×10-5mol/L、2×10-5mol/L、6×10-5mol/L和1×10-4mol/L。
3.如权利要求1所述的利用碳量子点检测溶液中葡萄糖浓度的方法,其特征在于,所述葡萄糖氧化酶溶液的浓度为3×10-4g/L,所述邻苯二胺溶液的浓度为3×10-2mol/L,所述辣根过氧化物酶溶液的浓度为1×10-5g/mL,所述碳量子点溶液的浓度为5.3×10-6g/mL,且所述葡萄糖氧化酶溶液、邻苯二胺溶液、辣根过氧化物酶溶液和碳量子点溶液的溶剂均为Tris-HCl缓冲液,其pH为7.4、浓度为0.05mol/L。
4.如权利要求1所述的利用碳量子点检测溶液中葡萄糖浓度的方法,其特征在于,所述荧光分光光度计的测定条件:激发波长为380nm,激发和发射狭缝均为5nm。
5.如权利要求1所述的利用碳量子点检测溶液中葡萄糖浓度的方法,其特征在于,B中,所述不同浓度的葡萄糖标准溶液与所述葡萄糖氧化酶溶液、邻苯二胺溶液和辣根过氧化物酶溶液,于37℃混合反应的时间为30min。
6.如权利要求1所述的利用碳量子点检测溶液中葡萄糖浓度的方法,其特征在于,B中,加入所述碳量子点溶液后,使用微量进样器进行搅拌。
7.如权利要求1所述的利用碳量子点检测溶液中葡萄糖浓度的方法,其特征在于,碳量子点的制备方法为:将2.5重量份的马蹄和2.5重量份的洋葱放入烘箱烘干后,研磨成粉末;向所得粉末中加入30重量份的超纯水,搅拌均匀,得混合液;将所述混合液转入反应釜中,于180℃下加热4h后,取出,再于12000rpm离心20min,收集产生的棕色混合物;将所述棕色混合物通过超纯水中的透析膜透析48小时,收集内液并将其进行冷冻干燥,即得。
8.如权利要求7所述的利用碳量子点检测溶液中葡萄糖浓度的方法,其特征在于,碳量子点制备时,将所述混合液转入反应釜之前,还包括,先将所述混合液放入-18℃下冷冻24h,再将其于500W下微波辐照4min,待冷却至室温后,加入超纯水,补充散失的水分,循环处理4次。
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